Dissertation Klaus Heitkamp 1999

96 4 Ergebnisse und DiskussionReagenzienlösung erfolgen. Um dies zu überprüfen, wurde zunächst ein Reaktor 50/63,2 indas HPLC-System eingebaut und mehrfach hintereinander jeweils 20 µl einer methanolischenLösung von 13S-Hydroperoxy-octadeca-9(Z),11(E)-diensäuremethylester (100 µmol/l)injiziert. Die Flußrate der Reagenzlösung betrug 0,5 ml/min. Die Temperatur desEnzymreaktors wurde im Bereich von 20-40 °C jeweils um 5 °C erhöht. Die sich darausergebende Temperaturabhängigkeit ist in nachstehender Abbildung dargestellt.Peakfläche in rel. Einheiten ...(FL-Detektion) ...3.0E+062.5E+062.0E+061.5E+061.0E+0615 20 25 30 35 40 45Temperatur des Reaktors in °CAbbildung 45Abhängigkeit des Response am Fluoreszenz-Detektor von der Temperaturdes Enzymreaktors bei der RP-HPLC-Bestimmung von 13S-HPODAb einer Reaktortemperatur von etwa 30 °C war eine deutliche Abnahme des Response meßbar,während im Bereich von 20 - 30 °C die Signalintensität annähernd gleich blieb. Einegenaue Temperierung der Enzymreaktoren war deshalb bei einem Einsatz in der HPLC nichterforderlich. Die Reaktoren wurden deshalb bei Raumtemperatur betrieben. Um denapparativen Aufwand möglichst gering zu halten, wurde eine Temperierung des Reaktors aufweniger als 20 °C nicht in Betracht gezogen.In weiteren Versuchen wurde die Abhängigkeit der Signalintensität von der Flußrate der Reagenzlösunguntersucht. Dazu wurde ebenfalls das in Kapitel 6.6.5 beschriebene 2-Pumpen-System eingesetzt. Die Temperatur des Enzymreaktors betrug etwa 22 °C (Raumtemperatur).Die Flußrate der PES-Lösung wurde von 0,1 ml/min bis 0,5 ml/min variiert. Bei Verwendungeines Enzymreaktors 50/63,2 ergaben sich für 13S-HPOD und 13S-HPOD-Me-Ester als Testsubstanzendie in Abbildung 46 dargestellten Kurven.