Dissertation Klaus Heitkamp 1999

VAbbildung 25 Änderung der Extinktion einer Lösung von N,N,N´,N´-Tetramethyl-1,4-phenylendiamin bei 613 nm nach Zugabe von Hydroperoxyoctadecadiensäureohne und mit Fe 2+ -Katalyse ......................................................... 54Abbildung 26 Alterung des TMPD-Reagenzes in Abhängigkeit verschiedener Zusätze ... 55Abbildung 27 Vergleich der Nachweisgrenzen photometrischer Bestimmungsmethodenfür Lipidhydroperoxide ......................................................................... 58Abbildung 28 Kalibriergeraden für 13S-HPOD und 13S-HPOT beim TBA-Test.............. 60Abbildung 29 Trennung der Hydroperoxide des Ölsäuremethylesters an LiChrospherSi 60 mit Hexan/2-Propanol 99/1 ................................................................ 63Abbildung 30 Trennung der Hydroperoxide des Linolsäuremethylesters an LiChrospherSi 60 mit Hexan/2-Propanol 99/1; Detektionswellenlänge 200 nm ... 64Abbildung 31 Trennung der Hydroperoxide des Linolsäuremethylesters an LiChrospherSi 60 mit Hexan/2-Propanol 99/1; Detektionswellenlänge 234 nm ... 64Abbildung 32 Trennung der Hydroperoxide des Linolensäuremethylesters an LiChrospherSi 60 mit Hexan/2-Propanol 99/1; Detektionswellenlänge 200 nm ... 65Abbildung 33 Trennung der Hydroperoxide des Linolensäuremethylesters an LiChrospherSi 60 mit Hexan/2-Propanol 99/1; Detektionswellenlänge 234 nm ... 65Abbildung 34 Trennung der Hydroperoxide des Ölsäuremethylesters an LiChrospherSi 60 mit Hexan/2-Propanol 99,5/0,5; Detektionswellenlänge 200 nm....... 67Abbildung 35 Vergleich des Responseverhaltens von 1,5-Diphenylcarbohydrazid(DPC) in Abhängigkeit vom eingesetzten Lösungsmittel............................ 70Abbildung 36 Zeitlicher Verlauf der Peakhöhen bei der mehrmaligen Injektion einerLösung von 13S-HPOD-Me-Ester 500 µmol/l (30 mg DPC/50 ml; 25 mPTFE-Kapillare 0,3 mm ID; 65°C).............................................................. 77Abbildung 37 Zusammenhang zwischen Peakfläche und Konzentration bei der Nachsäulenderivatisierungmit DPC .................................................................... 77Abbildung 38 Analyse verschiedener Hydroperoxide aus der Oxidation von Fettsäuremethylesternmit Singulettsauerstoff (Säule: Superspher Si 60; 250-4;Eluent: Hexan/2-Propanol 99/1) .................................................................. 80Abbildung 39 Strukturformel von Mikroperoxidase-11 (MP-11) ...................................... 84Abbildung 40 Reaktionsverlauf der Immobilisierung von Enzymen mit EDAC anAminopropyl-CPG-Beads............................................................................ 86Abbildung 41 Nachweis von Hydroperoxiden durch enzymkatalysierte Kupplung von4-Aminoantipyrin mit Phenol ...................................................................... 87Abbildung 42 Nachweis der Aktivität immobilisierter Glucoseoxidase............................. 88Abbildung 43 Bestimmung der Aktivität der immobilisierten Mikroperoxidase (Beadsorte50/63,2) ............................................................................................... 94Abbildung 44 Aktivität der Enzymimmobilisate in Abhängigkeit von der verwendetenBeadsorte ..................................................................................................... 95Abbildung 45 Abhängigkeit des Response am Fluoreszenz-Detektor von der Temperaturdes Enzymreaktors bei der RP-HPLC-Bestimmung von13S-HPOD ................................................................................................... 96