Dissertation Klaus Heitkamp 1999

12 3 Theoretischer TeilHHR1R2R1R2(I)HB -LOFe(III) Fe(II) + H +(II)O 2enzymatischaerobR1HHOO(IIIb)(R)- oder (S)-IsomerR 2Abbildung 6 Reaktionsschema zur enzymatischen Oxidation von Lipiden mit Typ I-Lipoxidase (Erklärung siehe Text) 24,25R1HOO(IIIa)R2Bei der aeroben Reaktion wird die mehrfach ungesättigte Fettsäure (I) zunächst durch einenzymgebundenes Nucleophil LOB - deprotoniert und anschließend stereoselektiv zu dem entsprechendenHydroperoxid (IIIb) oxidiert.Die enzymkatalysierte Oxidation hat jedoch den Nachteil, daß nur aus Sojabohnen gewonneneLipoxidase in größeren Mengen käuflich ist. Möchte man also andere Isomere als die,die Sojalipoxidase liefert, in reiner Form darstellen, so müssen die dafür notwendigenEnzyme zunächst mit recht aufwendigen Methoden isoliert werden.Die Isolierung von Lipoxidasen aus pflanzlichen Materialien erfolgt in der Regel durchHomogenisierung des Pflanzenmaterials bei 0-4 °C, fraktionierte Proteinfällung mit Ammoniumsulfat,Dialyse gegen Pufferlösung und anschließende chromatographische Aufreinigung(Größenausschluß-, Adsorptions- oder Ionenaustauschchromatographie). 26,273.1.4 Chemoenzymatische Synthesewege für isomerenreine LipidhydroperoxideNeben den vorgestellten Synthesewegen für Hydroperoxide aus den entsprechenden Fettsäurenbzw. Fettsäureestern wurde auch die Synthese isomerenreiner 5-Hydroperoxy- und15-Hydroperoxyeicosatetraensäure auf chemischem Wege beschrieben. 28,29 In isomerenreinerForm waren diese Verbindungen aufgrund ihrer geringen Stabilität und der begrenzten Verfügbarkeitder entsprechenden Lipoxidasen in größerer Menge nicht herstellbar, obwohlgerade ihnen als Vorstufen der Leukotriene und anderer biologisch aktiver Verbindungen sehr