Dissertation Klaus Heitkamp 1999

4 Ergebnisse und Diskussion 103Vergleicht man die in Tabelle 30 aufgeführten Parameter der Kalibriergeraden, so erkenntman weiterhin, daß die Hydroperoxyfettsäuren und deren Methylester nicht den gleichenResponse lieferten. Trotz gleicher Konzentration im Testgemisch wurden für die Säurengegenüber den entsprechenden Methylestern bis zu 30 % kleinere Signale erhalten. Ursachekönnte eine geringere Reaktionsgeschwindigkeit der Mikroperoxidase mit den Fettsäurensein.In einem letzten Schritt wurde der Einfluß der Beadsorte und der Packverfahren (vgl. 4.5.6)auf die Peakbreite im HPLC-System bestimmt. Die Ergebnisse sind in Tabelle 31 zusammengefaßt.DetektionssysstemPackverfahrender Reaktorent R (13S-HPOD)in minw h (13S-HPOD)in mint R (13S-HPOD-Me-Ester)in minw h (13S-HPOD-Me-Ester)in minUV-Detektion ⎯ 1,95 0,2 4,93 0,29Fluoreszenz-Detektion⎯ 2,24 ⎯ 3,64 ca. 0,36möller 11 nachHein-Fluoreszenz-Detektionmit Reaktor50/78,8SuspensionstechnikFluoreszenz-Detektionmit Reaktor50/125KombinationsmethodeFluoreszenz-Detektionmit Reaktor50/99,8KombinationsmethodeFluoreszenz-Detektionmit Reaktor50/78,8KombinationsmethodeFluoreszenz-Detektionmit Reaktor50/63,2Kombinationsmethode2,20 0,38 5,68 0,442,48 0,37 5,53 0,412,46 0,37 5,21 0,412,59 0,38 5,37 0,442,56 0,37 5,43 0,43Tabelle 31Retentionszeiten t R und Peakbreiten auf halber Höhe w h von 13S-HPOD und13S-HPOD-Me-Ester in Abhängigkeit von der Beadsorte und dem Packverfahrender EnzymreaktorenIm Vergleich zum HPLC-System mit UV-Detektion ergab sich bei Verwendung der herkömmlichenFluoreszenz-Detektion nach Heinmöller 11 aufgrund der Zudosierung des Reagenzesund des Einsatzes längerer Kapillaren eine deutliche Peakverbreiterung. Diese wurde