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EL IMPACTO DE LOS FONDOS MIXTOS EN EL DESARROLLO REGIONAL
En este proyecto nos propusimos montar los métodos para analizar la carga viral, la
integración del genoma de VPH16 y la expresión de la proteína p16 INK4a como marcadores
de progresión de las lesiones neoplásicas y el polimorfismo del gen p16 INK4a como
marcador de riesgo de desarrollar CaCu invasor.
Carga viral e integración de VPH
La carga viral elevada (medida por el número de copias de genoma de VPH) y la integración
del genoma viral son más frecuentes en las lesiones de alto grado y parecen aumentar la
velocidad de progresión hacia el cáncer invasor (Nagao y col., 2002).
La PCR en tiempo real o cuantitativa (qPCR) se emplea para determinar indirectamente
el estado físico del genoma de VPH16 porque distingue la forma episomal pura de las
formas mixtas (i.e., episomal e integrada) del ADN de VPH16 (Nagao y col., 2002). Se
basa en la interrupción preferente del gen E2 durante la integración del genoma viral,
que se acompaña de pérdida de ciertas secuencias del mismo gen. El número de copias
del oncogén E6 y del gen E2 son equivalentes en las formas episomales, en tanto que
el número de copias del gen E2 es menor que el de E6 en las formas mixtas (episomal e
integrada) y nulo en las formas integradas puras (Nagao y col., 2002).
Polimorfismo y expresión del gen p16 INK4a
Ciertas mutaciones puntuales (“polimorfismos” o “SNP”) del gen p16 INK4a están asociados
a la progresión tumoral en pacientes con cáncer colorrectal (McCloud y col., 2004).
Por otra parte, la proteína p16 INK4a es un buen marcador de la progresión de lesiones
neoplásicas porque se sobreexpresa únicamente en las células basales o parabasales del
epitelio del cuello uterino con lesiones inducidas por VPH-AR con desregulación celular
debida a la expresión de los oncogenes virales (Puig-Tintoré, 2003; Agoff y col., 2003;
Wang y col., 2004; Volgareva y col., 2004).
El interés en el gen p16 INK4a y sus alelos polimórficos deriva de abundantes evidencias
sobre su papel en la supresión de tumores. En muchas genealogías de melanoma familiar
las mutaciones de p16 INK4a segregan con la enfermedad y una fracción significativa de
carcinomas primarios y esporádicos del esófago y páncreas tiene mutaciones puntuales
de p16 INK4a (Enders, 2003). McCloud y col. (2004) han asociado los polimorfismos de
p16 INK4a con la progresión tumoral en pacientes con cáncer colorrectal. A pesar de estos
antecedentes, hasta este proyecto no se había tratado de evaluar el polimorfismo del
gen p16 INK4a como factor de riesgo del CaCu.
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