23. Ulusal Biyokimya Kongresi Özel Sayısı - Türk Biyokimya Dergisi

XXIII. ULUSAL B‹YOK‹MYA KONGRES‹
29 Kasım - 2 Aralık 2011
Hilton Hotel - Adana
23. Ulusal Biyokimya Kongresi, Adana [23 rd National Biochemistry Congress, Adana / TURKEY]
İÇİNDEKİLER
İNORGANİK VANADAT VE İNSAN ERİTROSİTLERİNDE
GLUTATYON ÇIKIŞI
Yeliz ÇAKIR, Deniz YILDIZ
Mustafa Kemal Üniversitesi, Biyoloji, Hatay
INORGANIC VANADATE AND GLUTATHIONE EFFLUX FROM
HUMAN ERYTHROCYTES
Yeliz ÇAKIR, Deniz YILDIZ
Department of Biology, Mustafa Kemal University, Hatay
CONTENTS
SÖZLÜ SUNUM ÖZETLERİ
Özet: Çalışmanın ana amacı, vanadat’a maruz kalan insan eritrositlerinden
glutatyon çıkışı olup olmadığını araştırmaktı. Bu çalışmada, vanadat’ a maruz
kalmış eritrositlerin hücre içi ve hücre dışındaki sülfhidril düzeylerindeki (NPSH)
değişimler belirlenmiştir.Vanadat, zaman ve konsantrasyona bağlı olarak hücre içi
NPSH konsantrasyonlarını önemli ölçüde düşürmüştür. Eritrositler 10 mM vanadat’
a 4 saat süreyle maruz kaldıktan sonra hücre içi NPSH μmol/ml eritrosit düzeyine
düşmüştür. Hücre içi NPSH konsantrasyonun tamamen boşalmasıyla birlikte hücre
dışı NPSH konsantrasyonu 4 saatte 0.1410 ± 0.0005 μmol/ml eritrosit seviyesine
ulaşmıştır. Vanadat’a maruz kalmanın ortamdaki hücrelerin zarlarında hasara yol
açmadığı LDH aktivitesi ölçümü ile gösterilmiştir. Vanadat, insan eritrositlerine fosfat
alınımınıda sağlayan klor bikarbonat taşıyıcılarının inhibitörü olan DIDS, NPSH
nin hücre içi düşüş ve hücre dışı artışını önemli oranda inhibe etmiştir. Hücre dışı
NPSH düzeylerindeki artışa paralel olarak, vanadat’a maruz kaldıktan sonra hücre
dışı glutatyon düzeylerinde önemli artış olduğu saptanmıştır. 1, 5 ve 10 mM vanadat’a
maruz kaldıktan sonra hücre dışı glutatyon konsantrasyonları sırasıyla 0.0150 ± 0.001,
0.0330 ± 0.001, ve 0.0576 ± 0.002 μmol/ml eritrosit düzeyine ulaşmıştır. Bir MRP
inhibitörü olan MK571’ in kullanılması eritrositlerden glutatyon çıkışını azaltmıştır.
Glutatyon çıkışında gözlenen azalma, bu taşıyıcıların eritrositlerden glutatyon çıkışında
rolü olduğunu göstermektedir. Bu çalışmanın sonuçları eritrositlerin vanadat’a maruz
bırakıldıklarında hücre dışına glutatyonu transport ettiğini göstermektedir. Eritrositler
vanadat’a maruz bırakıldıklarında glutatyon oksidasyonuna ilave olarak hücre
dışına glutatyon çıkışının da hücre içi glutatyon kaybının diğer bir nedeni olduğu
görülmektedir.
Abstract: The main objective of the present study was to investigate if vanadate
exposure results in glutathione efflux from human erythrocytes. In the present
study, the changes in intracellular and extracellular non-protein sulfhydryl (NPSH)
levels were determined in vanadate exposed erythrocytes. Vanadate significantly
depleted intracellular NPSH level in a time- and concentration-dependent manner.
The intracellular NPSH level was completely depleted when erythrocytes were
exposed to 10 mM of Vanadate for 4 hours. Extracellular NPSH level was increased
concomitantly with the intracellular decrease and reached to 0.1410 ± 0.005 μmol/
ml erythrocyte in 4 hours. Erythrocyte membranes were not damaged over the
course of vanadate exposure as indicated by the absence of lactate dehydrogenase
activity in the extracellular media. Intracellular decrease and extracellular increase
in NPSH levels were significantly inhibited in the presence of DIDS, a chloridebicarbonate
exchanger which also mediates phosphate and vanadat transport in
erythrocytes. In parallel with the change in extracellular NPSH levels, significant
increases in extracellular glutathione levels were detected following exposure to
vanadate. Extracellular glutathione levels reached to 0.0150 ± 0.0.001, 0.0330
± 0.001, 0.0576 ± 0.002 µmol/ml erythrocyte with 1, 5, and 10 mM of vanadate
respectively. Utilization of MK571 a multi drug resistance-associated protein
1inhibitor decreased the rate of glutathione efflux from erythrocytes suggesting a
role for this membrane transporter in the process. The results of the present study
indicate that erythrocytes efflux glutathione when exposed to vanadate. In addition
to glutathione oxidation, glutathione efflux also contributes to intracellular loss of
glutathione when exposed vanadate.
ABSTRACTS OF ORAL PRESENTATIONS
Turk J Biochem, 2011; 36 (S2)
http://www.TurkJBiochem.com