23. Ulusal Biyokimya Kongresi Özel Sayısı - Türk Biyokimya Dergisi

XXIII. ULUSAL B‹YOK‹MYA KONGRES‹
29 Kasım - 2 Aralık 2011
Hilton Hotel - Adana
23. Ulusal Biyokimya Kongresi, Adana [23 rd National Biochemistry Congress, Adana / TURKEY]
İÇİNDEKİLER
P. 097 / RHOC, ROCKII VE MMP-2’NİN KOLOREKTAL KANSER
İNVAZYONU ÜZERİNDEKİ ETKİSİ
Didem KELEŞ 1 , Şeniz İNANÇ 2 , Aras Emre CANDA 3 , Cem TERZİ 3 ,
Murat SİPAHİ 2 , Hülya ELLİDOKUZ 4 , Mehmet FÜZUN 3 , Gülgün OKTAY 1
1 Dokuz Eylül Üniversitesi, Tıbbi Biyokimya, İzmir
2 Dokuz Eylül Üniversitesi, Moleküler Tıp, İzmir
3 Dokuz Eylül Üniversitesi, Genel Cerrahi, İzmir
4 Dokuz Eylül Üniversitesi, Prevantif Onkoloji, İzmir
P. 097 / THE EFFECTS OF RHOC, ROCKII AND MMP-2 ON
COLORECTAL CANCER INVASION
Didem KELEŞ 1 , Şeniz İNANÇ 2 , Aras Emre CANDA 3 , Cem TERZİ 3 ,
Murat SİPAHİ 2 , Hülya ELLİDOKUZ 4 , Mehmet FÜZUN 3 , Gülgün OKTAY 1
1 Medical Biochemistry, Health Science, Dokuz Eylul University, İzmir
2 Molecular Medicine, Health Science, Dokuz Eylul University, İzmir
3 Surgery, Health Science, Dokuz Eylul University, İzmir
4 Preventive Oncology, Oncology, Dokuz Eylul University, İzmir
CONTENTS
Kolorektal kanser (KRK) kaynaklı ölümlerin çoğu, primer tümörden çok metastatik
hastalık sonucu gerçekleşmektedir; bu nedenle akciğer, prostat ve meme kanserinden
sonra en sık ölümle sonuçlanan kanser türüdür. Yapılan araştırmalarda, ekstrasellüler
alanda yer alan matriks metalloproteinazların (MMP’ler) kolorektal karsinogeneze
katkıda bulundukları gösterilmiştir. Bununla birlikte hücre migrasyonunda rol
alan RhoC ve ROCKII proteinlerinin de KRK progresyonu ve metastazı ile ilişkili
olabileceği düşünülmektedir. Bu çalışmada; KRK hastalarından alınan tümörlü ve
eşlenik normal doku örneklerinde MMP-2, MMP-14, TIMP-2, RhoC ve ROCKII
ekspresyon ve aktivite düzeylerinin incelenmesi ve elde edilen sonuçların tümörün
klinikopatolojik değişkenleri ile karşılaştırılması hedeflenmiştir. Kolorektal tümör
ve eşlenik normal doku örneklerinde (n=23); RhoC, MMP-2, MMP-14 ve TIMP-
2 mRNA düzeyleri Real Time PCR; RhoC, MMP-2 ve ROCKII protein düzeyleri
Western blot; aktif ve latent-MMP-2 düzeyleri Jelatin Zimografi ve ROCKII aktivite
düzeyi ise ROCK Activity Assay ile incelenmiştir. TIMP-2 mRNA ekspresyonu,
tümör dokusunda normal dokuya göre anlamlı düşük (p=0,018) bulunurken, aktif-
MMP-2 düzeyi (p=0,002) ve aktif-MMP-2/pro-MMP-2 oranı (p=0,015) anlamlı
yüksek bulundu. Tümör dokularına ait sonuçlar klinik verilerle karşılaştırıldığında,
aktif-MMP-2 düzeyi ile müsinöz tümör (r=0,484 p=0,049); ROCKII aktivitesi ile
perinöral invazyon (r=0,731 p=0,025) ve T evre (r=0,830 p=0,006); RhoC protein
düzeyleri ile lenfatik invazyon (r=0,732 p=0,039); aktif-MMP-2/pro-MMP-2 oranı ile
N evre (r=0,510 p=0,037) ve P evre (r=0,628 p=0,007) arasında korelasyon görüldü.
Ayrıca MMP-2, MMP-14 ve TIMP-2 mRNA düzeyleri ve MMP-2 protein düzeyleri,
genç olgularda (65) kıyasla istatistiksel anlamlı yüksek bulundu.
Sonuçlar değerlendirildiğinde, RhoC’nin hem TIMP-2 düzeylerini düşürerek MMP-2
aktivasyonu aracılığıyla hem de aktif-ROCKII ve aktif-MMP-2 birlikteliği üzerinden
tümörün invazyon yeteneğini arttırdığı öngörülmektedir.
Most of deaths derived from colorectal cancer (CRC) are due to metastasis rather
than primary tumor; therefore CRC is the fourth leading cause of cancer death
after lung, prostate and breast cancers. It is known that matrix metalloproteinases
(MMPs) located in the extracellular area contribute to colorectal carcinogenesis. In
addition, RhoC and ROCKII proteins involved in cell migration are also thought to
be associated with CRC progression and metastasis. We aimed to investigate MMP-2,
MMP-14, TIMP-2, RhoC and ROCKII expression and activity levels in tumor and
paired normal tissue samples from CRC patients and compare with clinicopathologic
variables. In colorectal tumor and paired normal tissue samples (n=23), RhoC,
ROCKII, MMP-2, MMP-14 and TIMP-2 levels were investigated with Real Time
PCR, Western blot, Gelatin Zymography and ROCK Activity Assay. While TIMP-
2 mRNA expression was found significantly reduced (p=0.018) in tumor samples,
active-MMP-2 levels (p=0.002) and active-MMP-2/pro-MMP-2 ratio (p=0.015)
were found significantly increased. When compared with clinical data, there were
correlations between active-MMP-2 levels with mucinous tumor (r=0.484 p=0.049);
ROCKII activity with perineural invasion (r=0.731 p=0.025) and T-stage (r=0.830
p=0.006); RhoC protein levels with lymphatic invasion (r=0.732 p=0.039); active-
MMP-2/pro-MMP-2 with N-stage (r=0.510 p=0.037) and P-stage (r=0.628 p=0.007).
Additionally, MMP-2, MMP-14 and TIMP-2 mRNA levels and MMP-2 protein
levels were found significantly higher in younger patients (65). When the results are evaluated, it is predicted that RhoC increases the ability
of invasion both through activation of MMP-2 by decreasing TIMP-2 levels and the
coexistence of active-ROCKII and active-MMP-2.
Turk J Biochem, 2011; 36 (S2)
http://www.TurkJBiochem.com