23. Ulusal Biyokimya Kongresi Özel Sayısı - Türk Biyokimya Dergisi

XXIII. ULUSAL B‹YOK‹MYA KONGRES‹
29 Kasım - 2 Aralık 2011
Hilton Hotel - Adana
23. Ulusal Biyokimya Kongresi, Adana [23 rd National Biochemistry Congress, Adana / TURKEY]
İÇİNDEKİLER
P. 082 / ANİLİNİN UV POLİMERİZASYONU YOLUYLA ANTİ-
AFLATOKSİN B1 İN İMMOBİLİZASYONU VE ELEKTROKİMYASAL
İMPEDANS SPEKTROSKOPİSİ ÜZERİNDEN AFLATOKSİN B1 İN
TAYİNİ
Erhan DİNÇKAYA 1 , Özer KINIK 2 , Mustafa Kemal SEZGİNTÜRK 3 ,
Çağrı ALTUĞ 1 , Aylin AKKOCA 1
P. 082 / IMMOBILIZATION OF ANTI-AFLATOXIN B1 ANTIBODY
BY UV POLYMERIZATION OF ANILINE AND AFLATOXIN
B1 DETECTION VIA ELECTROCHEMICAL IMPEDANCE
SPECTROSCOPY
Erhan DİNÇKAYA 1 , Özer KINIK 2 , Mustafa Kemal SEZGİNTÜRK 3 ,
Çağrı ALTUĞ 1 , Aylin AKKOCA 1
CONTENTS
1 Ege Üniversitesi Fen Fakültesi, Biyokimya, İzmir
2 Ziraat Fakültesi, Ege Üniversitesi, Süt Teknolojisi, İzmir
3 Namık Kemal Üniversitesi Fen Edebiyat Fakültesi, Kimya, Tekirdağ
1 Biochemistry Department, Faculty of Science, Ege University, İzmir
2 Dairy Technology, Faculty of Agriculture, Ege University, İzmir
3 Chemistry, Faculty of Arts and Sciences, Namık Kemal University, Tekirdag
Günümüze kadar, flamentli mantarlar tarafından üretilen mikotoksin olarak
sınıflandırılan 300 den fazla sekonder metabolit tespit edilmiştir. Bunların içinde,
özellikle Aspergillus flavus , Aspergillus parasiticus ve Aspergillus nomiusun
ürettiği aflatoksinler en önemli grubu oluştururlar. Aflatoksinler doğal koşullarda
en yüksek konsantrasyonda bulunan, yüksek düzeyde toksik, mutajenik, teratojenik
ve karsinojenik mikotoksin grubunu oluştururlar. Aflatoksinlerin bir çok çeşidi
bilinmektedir ancak içlerinde en tehlikelisi aflatoksin B1 dir Bu çalışmada kurutulmuş
gıdalarda aflatoksin B1 in pratik ve kesin tayini için biyosensör teknolojileri geliştirildi.
Bu alanda aflatoksinler gibi kısıtlı katalitik aktiviteye sahip billeşiklerin analizi
için elektrokimyasal impedans spektroskopisi (EİS) kullanılarak biyosensörlerin
geliştirilmesi gerçekleştirilmiştir. EIS son yıllarda çok çeşitli fiziksel ve kimyasal
özelliklerin belirlenmesinde çok duyarlı bir belirteç olarak ortaya çıkmıştır. EIS,
analitik çözümler sunmasının yanı sıra membran özelliklerinin belirlenmesi,
biyosensör karakterizasyonu ve fabrikasyonu amaçlı araştırmaların yapılmasına
olanak vermektedir. EIS, enzim-substrat etkileşimlerinde olduğunun aksine bağlanma
sonrası gerçekleşen reaksiyon dizileri içermeyen biyomolekül etkileşimlerinde
(antijen-antikor, DNA vb.), affinite etkileşimlerinden sonra meydana gelen yük
transfer değişimleri yoluyla etkileşimi belirlenebilir kılar. Çalışmada elektrokimyasal
impedans spektroskopisi temelli bir biyosensörün geliştirilmesi anlatıldı. Bu afinite
temelli biyosensör aflatosin B1 ile spesifik bağ yapan anti-aflatosin B1 ile oluşturuldu.
Elektrotdu geliştirdik ve ölçüm koşullarını optimize ettik. Optimizasyon kosulları:
Optimum bağlanma süresi 30 dakika, optimum doğruakım potansiyeli 25mV ve
optimum karıştırma hızı 100 rpm olarak bulundu. Karakterizasyon çalışmalarında
doğrusal tayin aralığı, tekrarlanabilirlik, tekrar üretilebilirlik ve örnek analizi
gerçekleştirildi. Bu proje TÜBİTAK proje no: 106 T 367 ve Ege Üniversitesi Bilimsel
araştırma projesi tarafından ( E.Ü. BAP 2007 ) desteklenmiştir
Today there are more than 300 seconder metabolites classes of mycotoxins produced
by flamentous fungus. The aflatoxins which produced by funguses Aspergillus flavus
, Aspergillus parasiticus and Aspergillus nomius are the most important group of these
metabolites. Aflatoxins are a group of mycotoxins naturally occurred at high levels as
very high toxic, mutagenic, teratogenic and carcinogenic compounds. Several varieties
of aflatoxins are known, but the most dangerous is Aflatoxin B1. In this study we were
developed biosensor technologies for determination of aflatoxin B1 levels in dry food
products quickly, practically and accurately. In this scope, it is realized to develop the
biosensors utilizing electrochemical impedance spectroscopy (EIS) for analyzing of
the compounds that has a restricted catalytic interaction activity such as aflatoxins. In
recent years, EIS becomes a power tool for examining many chemical and physical
processes. EIS presents analytical solutions for some processes, besides, scientific
researches such as determining of membrane specifications, biosensor characterization
and fabrication can be realized by EIS techniques. Conversely, of enzyme-substrate
interactions, biomolecule interactions which have no reaction sequence after binding
like antigen-antibody, DNA etc, charge transfer changes occurred after affinity
interactions can also be monitored by the help of EIS. In this study we were developed
a biosensor which is based on electrochemical impedance spectroscopy. This affinity
based biosensor was constructed anti aflatoxin B1 antibody which specific bind with
aflatoxin B1. We developed the electrode and optimized the measurement conditions.
Optimum binding time was detected 30 minutes, optimum DC potential was detected
25 mV and optimum stirring velocity was detected as 100 rpm. Characterization
studies such as linear determination limits, repeatability, reproducibility and sample
analysis were performed. This work was supported by TÜBİTAK Project Number:
106 T 367 and Ege University Scientific Research Project ( E.Ü. BAP 2007 ) Project
Number: 106 T 36
Turk J Biochem, 2011; 36 (S2)
http://www.TurkJBiochem.com