23. Ulusal Biyokimya Kongresi Özel Sayısı - Türk Biyokimya Dergisi

XXIII. ULUSAL B‹YOK‹MYA KONGRES‹
29 Kasım - 2 Aralık 2011
Hilton Hotel - Adana
23. Ulusal Biyokimya Kongresi, Adana [23 rd National Biochemistry Congress, Adana / TURKEY]
İÇİNDEKİLER
P. 030 / BORTEZOMİB İSKELET KASI HÜCRELERİNDE
HİPERKATABOLİK SENDROMUN İNDÜKLEDİĞİ PROTEAZOMAL
YOLU BASKILAR: ÖN BULGULAR
Halil RESMİ 1 , Ebru TAYLAN 1 , Kerim DOYURAN 2
1 , Dokuz Eylül Üniversitesi, Tıbbi Biyokimyaİzmir
2 Dokuz Eylül Üniversitesi, Temel Sinir Bilimleri, İzmir
P. 030 / BORTEZOMIB INHIBITS PROTASOMAL PATHWAY
INDUCED BY HYPERCATABOLIC SYNDROME IN SKELETAL
MUSCLE CELLS: PRELIMINARY RESULTS
Halil RESMİ 1 , Ebru TAYLAN 1 , Kerim DOYURAN 2
1 Medical Biochemistry, Dokuz Eylul University, Izmir
2 Department of Neurological Science, Dokuz Eylul University, Izmir
CONTENTS
Bortezomib, multiple myeloma tedavisinde kullanılan bir ilaçtır. Antiproliferatif ve
proapoptotik etkilerinin yanında, NFKB inhibisyonu üzerinden antiinflamatuvar
özelliğe sahip olması nedeniyle birçok hastalıkta da yararı olabileceği düşünülmektedir.
Hiperkatabolik sendrom, inflamatuvar sitokinler ve katabolik hormon düzeylerinin
artışıyla tanımlanan biyokimyasal bir durumdur. Önemli sonuçlarından birisi de kas
atrofisidir. Bu çalışmada, bortezomib ile beklenen proteazomal inhibisyon üzerinden
kas proteinlerindeki yıkımın engellenmesi amaçlanmıştır. Sıçan myoblastları (L6)
serum içeriği %2’ye düşürülüp insülin eklenerek myotüplere farklılaştırıldı. Hücreler
sıra ile 25 mM glukoz içeren ortamda 24 saat, 50 ng/ml TNF-alfa ortamında 12
saat bekletilerek hiperkatabolik durum oluşturuldu. Ortamlara farklı dozlarda ve
inkübasyon sürelerinde bortezomib (5, 10 ve 20 nM) eklendi. Kimotripsin benzeri
proteazomal aktivitenin yanı sıra, beta 5 ve C2 alt birimlerinin ekspresyon düzeyleri
ile NFKB’nin nükleer translokasyonunu belirlemek için Western blot analizi yapıldı.
Hiperkatabolik durum oluşturulan iskelet kas hücrelerinde 12 ve 24 saat inkübasyon
sonucu proteazomun hem beta 5 hem de C2 alt birimlerinin ekspresyonu kontrole (5
mM glukoz) göre artarken, Bortezomib uygulandığında ise konsantrasyon bağımlı
olarak azaldı. Kimotripsin benzeri enzim aktivitesi de benzer değişim gösterdi.
Sonuç olarak, bortezomib hiperkatabolik durum sonucu meydana gelen proteazom
aktiviteyi baskıladığından, kas kaybının engellenmesinde tedavi edici bir ajan olarak
düşünülebilir.
Bortezomib is a drug which is used in the treatment of multiple myeloma. Because of its
antiproliferative, proapoptotic and antiinflamatory (by inhibition of NFKB) properties,
there are a lot of studies about possible benefits of bortezomib. Hypercatabolic
syndrome is a biochemical state characterized by increased inflammatory cytokines
and catabolic hormone levels. One of the most important results of it is muscle atrophy.
In this study, we aimed to prevent muscle breakdown by proteasomal inhibition by
using bortezomib. Rat myoblasts were differentiated into myotubes by reducing the
serum to 2% and adding insulin. Hypercatabolic syndrome was created by incubation
of cells in mediums with 25 mM glucose for 24 h, 50 ng/ml TNF-alpha for 12 h.
At the end of this time, different concentrations of bortezomib (5, 10 and 20 nM)
was added to the medium for different incubation times. Chymotrypsin-like activity
and protein expressions of beta 5 and C2 subunits and NFKB translocation have
been analyzed. In skeletal muscle cells that were in hypercatabolic conditions, beta
5 and C2 expressions of proteasome increased at the end of 12 and 24 h according to
control. When bortezomib was added to the medium, the expressions of the proteins
were attenuated in a concentration dependent manner. Chymotrypsin-like enzyme
activity also showed a similar change. In conclusion, bortezomib can be thought as a
therapeutic agent in prevention of muscle wasting in diabetes, because of its role by
supressing proteasomal activity.
Turk J Biochem, 2011; 36 (S2)
http://www.TurkJBiochem.com