CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

la segunda adyuvante incompleto de Freund, y las demás las hacen en P.B.S.
cada dos semanas.
En una primera experiencia inyectan las ratas con el antígeno del
agregado 848—14 (200 ug/rata); en la segunda experiencia inyectan los ani—
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males con 10 células secretoras del 848—14 fijadas del modo descrito y en
la tercera administran el anticuerpo monoclonal purificado con sulfato amó-
nico en P.B.S. (200 ug/rata). Sangran los animales cada dos semanas después
de la primera inyección y recogen el suero por centrifugación, almacenándo-
lo a —209C. Para comprobar la especificidad del anti—idiotipo así obtenido,
utilizan un E.L.I.S.A. “dot”, enfrentándolo a 1 ul del anticuerpo
monoclonal IgE (60 uglmí).
KIM y col. (1.989) producen un anticuerpo anti—idiotipo (Ab2)
monoclonal en ratones BALB/c inmunizados con el anticuerpo monoclonal
SD—3—6 (Abí) purificado, el cual reconoce un epitopo del antígeno de super-
ficie del virus de la hepatitis E. Para ello, inmunizan los ratones vía
I.P. con 100 ug del idiotipo 8D-3-6 en adyuvante completo de Freund, admi-
nistran dos dosis de recuerdo en adyuvante incompleto de Freund con inter-
valos de tres semanas y, a las tres semanas siguientes, inmunizan de nuevo
con 50 ug de Abí en P.E.S. 50 mM pH 7,2. Cuatro días después fusionan los
esplenocitos de los ratones inmunizados con células de mieloma 5P2/0—Agl4,
utilizando polietilenglicol 1.500. Seleccionan los clones secretores de Ab2
mediante E.L.I.S.A., subclonan por dilución límite e inyectan los
hibridomas en ratones tratados con pristane, provocando la subsiguiente
ascitis. Recolectan el fluido ascítico y lo purifican por cromatografía de
Proteina A—Sepharosa CL—4B.
Los clones secretores se seleccionan en base a la capacidad de unión
de los sobrenadanres al anticuerpo idiotípico (Abí), así como por su capa-
cidad para inhibir la unión del anticuerpo idiotípico al antígeno específi-
co.
PALOMO y col. (1.990) obtienen anticuerpos anti—idiotipo (Ab2)
policlonales en conejos, frente a anticuerpos monoclonales que reconocen la
glicoproteina 47F o las glicoproteinas 63G, 620 ó 740 del virus sincitial
respiratorio humano. Utilizan conejos blancos Nueva Zelanda a los que in-
yectan intradérmicamente, en múltiples sitios, 500 ug de fragmentos F(ab) 2
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