CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

entre x +/— 2a y x ~1— 4o, es decir, D.C. entre 0,500 y 0,700) y positivo
fuerte (DO. superiores a x +1— 4a, lo que supone D.C. superiores a 0.700).
HERSKOVIC y ASTORGA (1.985) estudian la presencia de anticuerpos
anti—Toxocara mediante el método E.L.I.S.A. , utilizando antígeno de T.canis
y A.suum, realizando la absorción de los sueros con antígeno de A.suum.
Utilizan como sustrato ácido 5—aminosalicílico y consideran el título como
la última dilución que produce un cambio evidente de color.
HERRflAN y col. (1.985) utilizan F.L.I.S.A. con antígeno total larvario
para medir la concentración de anticuerpos anti—T.canis en sueros humanos.
Afirman que esta técnica proporciona un 78%. — 90% de sensibilidad y una
especificidad superior al 90%. Expresan el título como el logaritmo en base
dos, igual o superior a cinco,
EDWARDS y PORUELI (1.985) utilizando la técnica de POLLARD y col.
(1.979) consideran positivo en E.L.I.S.A., para T.0., un título de 1/64, en
un sistema que, según ellos, presente una especificidad del 90% a títulos
superiores a 1/32.
GLICKHAN y col. (1.985, 1.987) afirman que E.L.I.S.A. con antígeno F/S
de T.canis es un método válido, sin necesidad de absorber los sueros, para
diferenciar casos de retinoblastoma de otros afectados por T.O., prefirien-
dolo al extracto de huevos embrionados.
BRUNELLO y col. (1.986) utilizan el E.L.I.S.A. indirecto, descrito por
VOLLFRy col. (1.976), para detectar IgO específica frente al antígeno FIS
de T. canis en sueros humanos. Tapizan las placas con 100 ul del antígeno a
0,7 ug/ml, en tampón carbonato pH 9,6, durante toda la noche a 49C. Tras
lavar las placas cuatro veces con P.B.S.—Tween 20 al 0,05%. añaden 100 ul
de los sueros a la dilución 1/1.000 en P.B.S.—Tween. Incuban de nuevo toda
la noche a la misma temperatura, lavan y añaden 100 ul de anti-IgG humanas
conjugadas con peroxidasa a la dilución 1/1.500 en P.B.S.—Tween, incubando
una hora a 37QC. Tras el lavado, añaden 50 ul de o-fenilenodiamina en tan—
pón citrato fosfato pH 5,5, con un 0,15% de peróxido de hidrógeno. Frenan
la reacción a los 30 minutos añadiendo 50 ul de ácido sulfúrico 4N y deter-
minan los resultados por lectura espetrofotométrica a 490 mu.
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