CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

linfocitos.
b) — Inmediatamente centrifugar a 1.500 r.p.m. durante 30 minutos, con
lo que las larvas móviles quedarán en el sedimento, mientras que
ios huevos inifértiles o no eclosionados, y las larvas muertas,
permanecerán en la interfase.
c) — Lavar las larvas recogidas del sedimento con H.B.S.S. esteril
para eliminar los restos de reactivo,
3.2.4.- CULTIVO DE LARVAS “ IN VITEO “
Se utilizó el medio mínimo esencial de Eagle con sales de Earle,
suplementado con L-glutamina 2mM, al cual se añadió 5-fluoro-citosina al
0,01% y gentamicina al 0,4% para evitar contaminaciones micóticas y bacte-
rianas. Los cultivos se mantuvieron en estufa a una temperatura de 379C.
3.2.5.- OBTENCION DE ANTíGENOS
3.2.5.1.— OBIENCION DE ANTíGENO EXCRETOR—SECRETOR LARVARIo
a) - Lavar cinco veces en H.B.S.S. estéril las larvas obtenidas tras
la eclosión de huevos.
tú — Poner las larvas a cultivar, en tubos estériles de tapón de ros-
ca, en el medio de cultivo citado anteriormente, poniendo en cada
tuboS ml de medio a una concentración de lx ~ larvas/mí,
incubándolas en estufa a 3790.
c) - Examinar semanalmente la contaminación y mortalidad de los tubos.
d) - Desechar los tubos que muestran contaminación y en los que la
mortalidad exceda del 5%.
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