CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

e) — Dispersar la pasta en 7 ml de P.B.S. y delipidar con 3 ml de
n—hexano, mediante agitación enérgica y decantación de la fase
superior.
f) — Centrifugar a 10.000 r.p.m. a 49C durante 30 minutos y recoger el
sobrenadante como antígeno “crudo’.
g) — Valorar la concentración de proteinas.
h) — Fraccionar y congelar.
3 .2.6. - CONCENTRAGION DE ANTíGENO EXCRETOR-SECRETOR LARVAEIO
El antígeno E/S se concentró por presión positiva. Se utilizó el sis-
tema de ultrafiltración AMICON y los filtros YM 10, procesando el antígeno
de la siguiente manera:
a) — Mantener los filtros, si son nuevos, en solución salina por es-
pacio de 30 minutos, o bien, si estaban ya en solución de
mantenimiento, lavar simplemente.
b) — Montar el sistema de ultrafiltración y añadir la solución de
antigeno a concentrar.
c) — Aplicar presión positiva.
d) — Poner en marcha el sistema de agitación, cuidando que el flujo de
salida sea lento y concentrar hasta obtener el volúmen deseado.
e) — Valorar la concentración de proteinas.
187