CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

e) — Añadir el ácido caprílico muy lentamente, en agitación vigorosa y
dejar 30 minutos en incubación a temperatura ambiente y con la
misma agitación.
f) — Centrifugar a 490 y a 10.000 xg, durante 30 minutos.
g) - Recuperar el sobrenadante y tiltrarlo por membrana de celulosa.
Mantener en hielo durante este proceso, pues el ácido caprílico
puede precipitar. El filtrado ha de ser transparente.
h) — Neutralizar el pH a 7,2—7,4.
i) — Medir la D.O. del filtrado a 280 tun.
3.2.15.2.— PRECIPITACION CON SULFATO AMONICO
a) — Preparar una solución de 50 4(NH4)2 saturado en agua destilada.
b) - Poner en agitación el filtrado anterior sin hacer espuma y añadir
gota a gota el mismo volumen de la solución de SO (NR ) satura-
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do, a temperatura ambiente.
c) — Dejar en agitación de 20 a 30 minutos para que precipiten las
inmunoglobulinas.
d) — Centrifugar a 49C y a 10.000 xg, durante 30 minutos.
e) — Eliminar el sobrenadante y añadir al sedimento SO4 (NR)2 al 50%
de saturación. (Añadir la mitad del volumen que había antes de la
centrifugación, para obtener el mismo volumen inicial).
f) — Conservar a 420.
g) - En el momento de su use, centrifugar a 3.000 r.p.m. y a 496, du-
rante 20 minutos.
h) - Resuspender el sedimento en P.B.S., pH 7,4, con el volumen
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