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CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

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379C, lavan, añaden o—fenilenodiamina en tampón citrato fosfato pH 5,5 con<br />

un 0,015% de peróxido de hidrógeno, y frenan la reacción a los 30 minutos<br />

con ácido sulfúrico 4 N. Expresan los resultados después de leer<br />

espectrofotométricamente a 490 nm.<br />

MORETTI y PIERGILT FIORFTTI (1.988) realizan un estudio sobre niños en<br />

edad escolar mediante la determinación de anticuerpos TgG e 1gB. Para la<br />

Igo utilizan la técnica F,I.I.S.A. descrita por PIERGILI y col. (1.978) em-<br />

pleando antígeno LIS a una concentración de 9 ug/ml. Para la determinacion<br />

de IgE, utilizan la misma técnica pero amplificada mediante la adición de<br />

un conjugado adicional marcado (anti-Ig de conejo) después de la incubación<br />

con un conjugado sin marcar (TgG de conejo anti—IgE humana), realizando la<br />

lectura a 449 nm. Consideran positivos los sueros que a la dilución 11512<br />

dan una D.O. superior a la media más tres veces la desviación standard.<br />

INNCH y col. (1.988, b) utilizan F.L.IS.A. con antígeno FIS para el<br />

estudio de toxocarosís en sueros humanos de diferentes grupos socioeconómi-<br />

cos en Venezuela. Emplean el antígeno a 1 ng/ml en tampón carbonato pH 9,6.<br />

Realizan las diluciones seriadas de los sueros en P.B.S. con 0,1% de Tween<br />

20, y los incuban en presencia de extractos antigénicos no homólogos (de<br />

otros parásitos), Después de añadir anti-IgG humanas conjugadas con<br />

fosfatasa alcalina y p—nitrofenilfosfato en tampón de dietilamina como sus—<br />

trato, frenan con NaOH 214 y miden la DO. a 405 ¡ini.<br />

EMBIL y col. (1.988) analizan el suero de niños menores de 15 anos me-<br />

diante E.L.I.S.A. con antígeno FIS de T. canis, con el que tapizan las pla-<br />

cas a 1 uglpocillo. Añaden los sueros a la dilución 1/32 en P.B.S. con<br />

T”~een al 0,05% y B.S.A. al 1%, las anti-IgG humanas conjugadas con<br />

peroxidasa a la dilución 1/1.000 y como sustrato utilizan ácido 2,2 —azíno-<br />

di—3—etil—benzotiazolín sulfónico conteniendo un 0,01% de peróxido de hi-<br />

drógeno. Leen la DO. resultante tras 10 minutos de incubación a 405 nm,<br />

considerando positivos a aquellos sueros con un título mayor o igual a<br />

1/32.<br />

ROBERTSON y col. (1.988) utilizan el método E.L.I.S.A. para la detec-<br />

ción de anticuerpos anti-<strong>Toxocara</strong> por el método descrito por <strong>DE</strong> SAVTGNY y<br />

col. (1.979). Tapizan las placas con antígeno FIS a 1 uglmí en tampón car-<br />

bonato, pH 9,6 durante toda la noche a 49C; tras el lavado correspondiente<br />

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