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CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

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E.L.I.S.A. y microprecipiriación larvaria. Respecto al primero y en la<br />

prueba inicial, comprobamos una clara inhibición en la unión del anticuerpo<br />

monoclonal TC-1 a su antígeno específico, ya desde la primera de las con-<br />

centraciones ensayadas: a 3 ug/ml de TC—1 y dilución 1/2 del reactivo<br />

anti—idionípico, observamos un 66,32% de inhibición (Tabla CXVII y Figura<br />

74). En un segundo ensayo, utilizamos el anticuerpo idiotipico a concen-<br />

traciones superiores para determinar en que momento se producía la inhibi—<br />

cion. Para una dilución constante del reactivo anní—idiotípico de 1/2, em-<br />

pezando por una concentración de TC—1 de 15 ug/ml, observamos una clara<br />

inhibición entre 3,75 ug/ml y 1,87 ug/ml de este último (pasando de un<br />

20,64% a un 90,46% respectivamente, Tabla CXIX).<br />

Posteriormente ensayamos el reactivo anti—idionípico a distintas di-<br />

luciones (desde 1/3 a 1/48) frente a las concentraciones anteriores del<br />

anticuerpo idiotípico: observamos que a medida que diluimos el suero, la<br />

inhibición se produce a concentraciones mas bajas del anticuerpo monoclonal<br />

(Tablas CXX a CXXV). Así por ejemplo, a la dilución 1/3 se observó la in-<br />

hibición entre 3,75 ugimí y 1,87 ug/ml (pasando de un 0% a un 88%) y a la<br />

dilución 1/48, la inhibición se produjo entre 0,23 ug/ml y 0,11 uglml (pa-<br />

sando de un 46,89% a un 88,61%).<br />

En,el segundo tipo de E.L.I.S.A. de inhibición empleado, incubamos el<br />

anticuerpo idionípico marcado con bionina a concentración constante, con<br />

diluciones seriadas dobles de: fracción IgO del suero anni—idiotípico,<br />

antígeno E/S y suero negativo de conejo. Se observó, como cabía esperar,<br />

que el antígeno F/S dió lugar a inhibiciones superiores al 98% en todas las<br />

concentraciones estudiadas (desde 3 ug/ml hasta 0,04 ug/ml, Tabla CXXVIII).<br />

Por otro lado, la fracción IgG del suero anni—idiotípico fue capaz de des-<br />

plazar totalmente la unión del idiotipo a su antígeno específico, a con-<br />

centraciones superiores a 6 ug/ml (Tabla CXXIX). Como control de este en-<br />

sayo se estudió la unión inespecífíca de un suero negativo de conejo, ob-<br />

servando aproximadamente un 30% de inhibición en la unrion a las máximas<br />

concentraciones estudiadas (Tabla CXXVII, Figuras 80 y 81).<br />

Ensayos similares para evaluar la capacidad de inhibición, son reali-<br />

zados por GRZYCH y col. (1.985), PALOMO y col. (1.990) y RRESINA y OLDS<br />

(1.989). PALOMO y col. (1.990) realizan ensayos de inhibición mediante<br />

E.L.I.S.A. tapizando con el virus sincinial respiratorio humano, siguiendo<br />

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