CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

En el caso de la toxocarosis, nuestros intentos de inmunización con
extractos antigénicos de adultos y antígeno FIS, no han aportado datos po-
sitivos. Tampoco son muchos ni completos los éxitos obtenidos por otros
autores en sus intentos, rial y como revisamos en el apartado 5.3.. Sin em-
bargo, nuestras experiencias de protección pasiva con el anticuerpo
monoclonal ‘TC—1, arrojaron más esperanzas (50% de protección). Por todo
ello, hemos creido interesante abordar la obtención de anticuerpos
anti—idiotipo frente a este mismo anticuerpo monoclonal TC—1, como hacen
CRZYCH y col. (1.985) al obtener un anrii—idiotipo frente al monoclonal
IPLSm1 que previamente había resultado eficaz en ensayos de protección pa-
siva (27—62%), siendo del mismo modo específico frente a un antígeno
glicoproteico de 5. mansoni
5.5.1.- OBTENCION DEL SUERO ANTI-IDIOTIPICO
Como primer paso para la obtención de anticuerpos anti—idiotipo (Ab2)
frente al anticuerpo monoclonal TC—1 (Abí), procedimos a la preparación del
mismo para su utilización como inmunógeno. Puesto que la región variable de
toda innunoglobulina, cuya constitución antigénica forma el idiotipo, se
localiza en los fragmentos Fab, realizamos un tratamiento de digestión
pépsica que consiguiera la escisión de la molécula en los fragmentos
F(ab’) 2 y pFc’.
Para caracterizar el producto de la digestión se utilizó
electroforesis en SDS—PAGE. Analizamos alícuotas de la muestra digerida
(tfinal) y de la muestra sin digerir (t=0), en geles del 10% en condicio-
nes no reductoras y del 12,5% en condiciones reductoras, (Fotos 7 y 8 res-
pectivamente). La presencia de los fragmentos F(ab)’2 queda claramente re-
flejada en las bandas situadas a unos 110 Rl> y 25 Rl> de las calles B, en
los geles del 10% y el 12,5% respectivamente. Por otro lado, detectamos una
porción de muestra sin digerir en las bandas situadas a unos 150 Rl> en
condiciones no reductoras y a unos 51 Rl> (cadenas pesadas completas) en
condiciones reductoras, de las calles E de los mismos geles, así como por-
ciones de fragmentos pPc’ representados por la banda situada a unos 15 Xl>
de la calle E en el gel del 12,5%.
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