CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

trituradora, completando el volúmen hasta 50 ml. (100 ml para la
canal) con solución de citrato sódico al 0.25% en P.B.S.
c) — Triturar a 17.000 r.p.m. durante 8-10 segundos en el caso de
pulmones, hígado y vísceras (bazo, riñones y corazón) y durante
12—15 segundos en el caso de músculo de la pata y canal.
3.2,10.3.- DIGESTION
a) - Añadir al homogeneizado de cada tejido igual volumen del líquido
de digestión.
b) — Digerir en agitación rotatoria a 200 r.p.m. y 379C, durante 10—15
minutos hígado, pulmones y vísceras, y durante 20-30 minutos
músculo de la pata y canal.
c) — Frenar la reacción de digestión mediante la adición de 1,25 ml
de NaOH 3N (2,5 ml para la canal), con objeto de neutralizar el
pH, y de que la pepsina-clorhídrica no siga actuando.
3.2.10.4.— TAMIZADO
a) - Tamizar a través de un sistema formado por dos tamices de nylon
cuyos diámetros de malla son 0,063 m/m (tamiz superior) y 0,012
m/m (tamiz inferior), En el tamiz superior quedan retenidos los
restos de tejido sin digerir y en el inferior quedan retenidas
las larvas.
tú — Recoger las larvas del tamiz inferior, intentando arrastrar bien
con el mínimo volumen de agua.
c) — Recoger la suspensión de larvas, correspondiente a cada órgano,
por separado en un tubo de centrífuga de 50 ml.
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