CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

3,2.19.3.- ELECTROFORESIS EN GELES DE POLTACRILAMIDA (SDS-PAGE)
3.2,19.3.1.— Preparación del gel de resolucion
a) - Preparar el gel a la concentración de acrilamida-bisacrilamida
deseada, según tabla de preparación de geles por el método de
LAEMMLI,(LAEMMLI, 1.970) incluida en el apartado 3.1.3..
b) - Degasear en un kitasato mediante vacio durante 5-10 minutos y
poner en baño de hielo durante un minuto.
c) - Añadir las cantidades de persulfato amónico y TEMED adecuadas
según el protocolo referido en el punto a), y mezclar bien.
d) — Cargar el gel entre los dos cristales utilizando una jeringa con
aguja de 19 G, rápidamente pero sin hacer burbujas, hasta la al-
tura deseada.
e) - Con ayuda de una pipeta Pasteur, añadir agua destilada encima,
con cuidado de que quede una interfase nítida, para que el frente
del gel quede recto al solidificarse.
f) — Dejar gelificar hasta el día siguiente.
3.2.19.3.2.- Preparación del gel de concentración
a) — Retirar el agua depositada sobre el gel de resolución por
inclinación y con ayuda de papel de filtro Whatman n91, con cui-
dado de que no queden restos.
b) — Hacer la mezcla para el gel de separación según el protocolo de
LAEMMLI, (LAEMNILI, 1.970) reseñado en al apartado 3.1.3., para
obtener una concentración de acrilanida del 3,75%.
c) — Degasear durante dos minutos en baño de hielo.
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