CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

positivos aquellos sueros que provocan el desarrollo de puntos azules bien
definidos en los discos con antígeno.
Las modificaciones introducidas por CONDE—GARCíA y col. (1.989) son:
la utilización de un aparato Bio—Dot (Bio Rad) con membrana de nitrocelulo-
sa; el tampón es P.B.S. a pH 7,2; como solución de lavado utilizan
P,B.S.-Tween 20 al 0,5%; como conjugado anti-IgG conjugadas con peroxidasa
a la dilución 1/200; y frenan la reacción lavando las membranas con agua
destilada y dejándolas secar a continuacton. Emplean antígeno E/S de T.
canis a 1 ug/ml y utilizan los sueros desde la dilución 1/40 a 1/1.280,
considerando como positivos los que se tiñen a la dilución 1/120.
Entre las técnicas inmunológicas utilizadas para el diagnóstico de la
toxocarosis, hay que citar también la técnica de radioinmunoanálisis
(R.I.A.), que emplea antisueros marcados con isótopos radiactivos.
SMITH y col. (1.980) intentan la detección de anticuerpos frente a
T.canis en sueros humanos mediante la prueba del radioinmunosorbente en pa-
pel (P.R.I.S.T.). Utilizan a FIS sobre 15 discos de papel Whatman
activados con bromuro de cianógeno, añadiendo el antígeno a concentraciones
de 10, 100 y 500 ug. Para el revelado emplean anti-IgG humanas marcadas con
125í y expresan los resultados en c.p.m..
DESOWITZ y col. (1.981) determina IgL específica frente a T.canis en
pacientes asmáticos,~ mediante la prueba. del radioalergosorbente (R.A.S.T.)
en fase sólida, utilizando una concentración de antígeno de 10 mg. Conside-
ran positivo un porcentaje de actividad igual o superior al 5%.
GENCHIy col. (1.983, b) estudian la presencia de IgE anti T.canis en
sueros de . pacientes sintomáticos y donantes de sangre sanos. Utilizan
R.A.S.T. con material comercializadoy antígeno de larvas de T.canis. Ex-
presan los niveles específicos de IgE en porcentajes de radioactividad, se-
gún un sistema de referencia (clase O = ; clases 1, 2, 3 y 4 = + con ni-
veles de incremento). Los mismos autores (1.987) emplean esta técnica, des-
crita por hIEDE y col. (1.967), con algunas modificaciones, para la detec-
ción de IgE. Incuban partículas de poliestireno recubiertas con antígeno
FIS en un agitador horizontal durante tres horas y media, con 50 ul de sue-
ro. Tras el lavado con solución salina conteniendo Tween 20 al 0,4%, añaden
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