CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

objeto de disponer de una muestra preliminar de suero que nos permitiera
monitorizar el curso inicial de la respuesta. Posteriormente efectuamos un
total de cuatro sangrados.
5.5 .2 . - PURIFICAGION Y GARACTERIZACION DE LOS ANTICUERPOS
ANTI—IDIOTIPO
5.5.2.1.— ESTUDIO DE LAS ACTIVTDADES ANTI—ISOTIPICA Y ANTI—IDIOTIPICA
En esta primera parte del trabajo de purificación y caracterrizacton
del suero anti—ídiotípico, hemos procesado la muestra preliminar de suero
obtenido tras la primera dosis inmunizante y el suero procedente del primer
sangrado, en los dos conejos utilizados en la experiencia. Con objeto de
eliminar al máximo la posible actividad anni—isotzípica en los sueros, éstos
se purificaron parcialmente mediante cromatografía de afinidad, adsorbién-
dolos con inmunoglobulinas de ratón acopladas a una columna de Sepaharosa
4E activada con bromuro -de cianógeno. Una metodología similar utilizan
GOFFAN KEUTNER y col. (1.972), SACKS y col. (1.982), y PALOMO y col.
(1.990).
Una vez realizado el primer paso por la citada columna, ensayamos la
actividad anti—isonípica remanente, enfrentando los sueros en E.L.I.S.A. a
5 ug/ml de inmunoglobulinas de ratón. Observamos que a bajas diluciones, la
muestra preliminar de suero extraida de ambos conejos, mostraba una clara
actividad anrii—isotípica, siendo por otra parte, casi el doble en el caso
del conejo 2 respecto al conejo 1. A medida que nos desplazamos hacia di-
luciones -mas altas, la actividad anti—isotípica en el suero del conejo 1
fue disminuyendo rápidamente, hasta que a la dilución 1/8.000 ya no se de—
riectó mediante esta técnica (D.O. = 0,129). El suero del conejo 2, sin em-
bargo, continuó mostrándose bastante reactivo, y a la misma dilución
(1/8.000) siguió revelando una D.O. elevada (1,105). El mismo ensayo, con
los sueros del primer sangrado, presentó resultados similares al anterior,
con mayor reactuividad del-suero del conejo 2.
Paralelamente, con estos mismos sueros parcialmente purificados, en-
sayamos la actividad frente a su anticuerpo idionípico (Abí)
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