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CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

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3.2.7.1.— Microensayo 188<br />

3.2.7.2.—Macroensayo 188<br />

3.2.8.— Pautas de inoculacion 189<br />

3.2.8.1.— Pautas de inoculación en ratones 189<br />

3.2.8.1.1.— Inoculación con huevos embrionados 189<br />

3.2.8.1.2,— Inoculación con antígeno total de adultos 189<br />

3.2.8.1.3.— Inoculación con antígeno excretor—secretor<br />

larvario 190<br />

3.2.8.1.4.— Inoculación con el anticuerpo monoclonal TC-1 ... 191<br />

3.2.8.2.— Inoculación a conejos con el anticuerpo<br />

monoclonal TC—1 192<br />

3.2.9.— Pautas de tratamiento a ratones con Mebendazol 192<br />

3.2.10.— Método de recuperación larvaria 193<br />

3.2.10.1,— Diseccion 194<br />

3.2.10.2.— Homogeneizacton 194<br />

3.2.10.3.— Digestión 195<br />

3.2.10.4.— Tamizado 195<br />

3.2.10.5.— Recuento larvario 196<br />

3,2.11.— Investigación de larvas en la cavidad peritoneal 196<br />

3.2.12.— Obtención de sangre y sueros 197<br />

3.2.13.— Recuento de eosinófilos 197<br />

3.2.14.— Preparación de los anticuerpos monoclonales 198<br />

3.2.14.1.— Descongelación de células 198<br />

3.2.14.2.— Mantenimiento del hibridoma 198<br />

3.2.14.3.— Producción de ascitis 199<br />

3.2.15.— Purificación de inmunoglobulinas 199<br />

3.2.15.1.— Precipitación con ácido caprílico 199<br />

3.2.15.2.— Precipitación con sulfato amontco 200<br />

3.2.16.— Determinación de la concentración de inniunoglobulinas .. 201<br />

3.2.17.- Conjugación del anticuerpo monoclonal<br />

TC—1 con biotina 201<br />

3.2.18.— Método E.L.I.S.A 202<br />

3,2.18.1.— Determinación de anticuerpos 202<br />

3.2.18.2.— Determinación de inniunocomplejos 203<br />

3.2.18.3.— Detección del anticuerpo monoclonal TC—1 en suero<br />

de conejo 205<br />

3.2.19.- Obtención de anticuerpos anti—idiotipo frente al<br />

anticuerpo monoclonal TC—1 206<br />

XII

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