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CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

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* pocas larvas con precipitados.<br />

1 : larvas con precipitados pero no sueltos en el medio.<br />

2 : todas las larvas con precipitados, pocos sueltos en el medio.<br />

3 : precipitados abundantes en larvas y medio.<br />

3.2.20.3.2.- Inducción de la formación de anticuerpos<br />

anti—anti--idiotipo<br />

3.2.20.3.2.1.- Fanta de inmunizacion<br />

La inducción de anticuerpos antí—anti—idiotipo se realizó en un cone-<br />

jo, siguiendo la misma metodología utilizada para la obtención de los an-<br />

ticuerpos anti—idiotipo descrita en el apartado 3.2.19.4.. En este caso el<br />

inmunógeno consistió en un preparado de IgG aisladas del suero<br />

anti—idiotípico purificado, mediante columna de Proteina A—Sepharosa 4B. En<br />

la primera inoculación se administraron 390 ug en 1 ml de P.B.S. emulsio-<br />

nados en adyuvante completo de Freund 2x y en los recuerdos la dosis fue de<br />

120 ug de inmunógeno en 0,5 ml de P.B.S. y emulsionados en el mismo volumen<br />

de adyuvante incompleto de Freund.<br />

3.2.20.3.2.2.- Sangrado<br />

Inmediatamente después de la administración del primer recuerdo de las<br />

IgG anti—idiotipo (inmunógeno) se tomó una muestra preliminar de suero. Los<br />

posteriores sangrados se realizaron a los mismos tiempos señalados para la<br />

obtención de los anticuerpos anti—idiotipo (3.2.19.5.).<br />

3.2.20.3.2.3.- Ensayo de unión al antígeno excretor—secretor larvario<br />

La actividad del suero obtenido tras la inmunización del conejo con el<br />

preparado de anticuerpos anti—idiotipo, se estudió en un E.L.I.S.A si—<br />

guiendo los pasos descritos en el apartado 3.2.18.1., tras el tapizado de<br />

las placas con el antígeno EIS.<br />

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