CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

adecuado.
i) — Dializar frente a P.B.S., pH 7,4, a 496 durante toda la noche.
3 .2.16. - DETERNIMACION DE LA GONGENTRACTON DE INMUNOGLOBTJLINAS
a) — Medir la D.O. de las inmunoglobulinas, diluidas en P.B.S., a 280
mn.
b) — Dividir la D.C. del problema entre el factor 1,4 en el caso de
suero de ratón (una concentración de 1 mg de inmunoglobulina de
ratón/ml presenta una D.C. de 1,4) y entre el factor 1,38 en el
caso de suero de conejo (una concentración de 1 mg de
inniunoglobulina de conejo/ml presenta una D.C. de 1.38) para
obtener la concentración de imnunoglobulina/mí.
3.2.17. - CONJUGACION DEL ANTICUERPO MONOCLONAL TC-1 CON BIOTINA
a) — Dializar el 16—1, purificado por precipitación con ácido
caprílico y sulfato amónico saturado, a 1 mg/mí, frente a
0,1 14 pH 8 durante 24 horas con tres cambios de esta solución.
b) - Calentar a temperatura ambiente la biotin-N-succinimida antes
de abrirla. (Se conserva desecada a 090).
c) - Disolverla en dimetilsulfóxido a 1 mg/ml en el momento de
usarla, ya que su vida media es de minutos.
d) - Añadir 100 ul de éster por cada ml de anticuerpo. En el caso de
3HNa
anticuerpos monoclonales, esta cantidad puede variar de 60 a 240
ul por ml de anticuerpo monoclonal.
e) - Mantener dos horas a temperatura ambiente.
f) — Dializar frente a P.B.S. con timerosal al 0,01%.
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