CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

anticuerpo monoclonal con sulfato amónico. KRESTNA y OLDS (1.988) obtienen
antisuero anti—idiotípico.a partir de un anticuerpo monoclonal que reconoce
una glicoproteina presente en un extracto de adultos de 5. mansoni. Puri-
fican el monoclonal a partir de las ascitis mediante precipitación con
sulfato amónico y mediante cromatografía en columna CL6B.
En la segunda tendencia, además de la purificación anterior, se recu-
rre a la fragmentación enzimática. Así PALOMO y col. (1.990) obtienen an-
ticuerpos anrii—idioriipo frente a anticuerpos monoclonales que reconocen
diversos antígenos del virus sincítial respiratorio humano, preparando el
inmunógeno por un procedimiento muy similar al nuestro. Purifican los an-
ticuerpos del fluido ascítico correspondiente mediante cromatografía con
Proteina A—Sepharosa, mientras que nosotros la hacemos precipitando con
ácido caprílico y sulfato amónico. A continuación y al igual que nosotros,
los digieren con pepsina, separando después los fragmentos F(ab’) 2 genera-
dos de los péptidos pequeños, mediante diálisis con una membrana cuyo ta-
maño de poro proporciona un límite de exclusión de 50 KD. En nuestra opi-
nión, la obtención de fragmentos F(ab’)2 para su posterior utilización como
inmunógenos, es conveniente aunque no indispensable, puesto que se reduce
la respuesta anti—isotípica, facilitando por tanto la posterior purifica—
cion del suero anti—idioriípico.
Las pautas de inmunización tienen como denominador común la adminis-
tración de una primera dosis de inmunógeno en adyuvante completo de Freund,
normalmente por vía S.C., y de un número variable de recuerdos en adyuvante
incompleto de Freund. En el caso de la inmunización en conejos, la primera
dosis oscila entre 400 ug, como en nuestro caso, y 5 mg (RRESINA y OLDS,
1.988); mientras que los recuerdos varían entre los 100 ug de PALOMO y col.
(1.990), dosis muy similar a los 150 ug utilizados por nosotros, y los 5 mg
de XRESINA y OLDS (1.988). Respecto a la vía de administración, PALOMO y
col. (1.990) emplean, al igual que nosotros, la vía I.D. en múltiples si-
nos del lomo del animal para la primera dosis, y la vía 1.11. para los re-
cuerdos. Sin embargo RRESTNA y OLDS (1.988) utilizan la vía 5.0. en ambos
casos.
En cuanto los tiempos elegidos para el sangrado de los animales tam-
bién son muy variados. En nuestro caso realizamos una primera toma de san-
gre inmediatamente después de la administración del primer recuerdo, con
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