CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

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4.5.4.4.- ESTUDIO DE LA SEMEJANZA ESTRUCTURAL ENTRE LOS ANTICUERPOS ANTI-IDIO- TIPO Y EL ANTIGENO EXCRETOR—SECRETOR LARVARIO 4.5.4.4.1.- Estudios de inhibición de la unión del anticuerpo idiotipico (an-ET1 w131 7 ticuerpo monoclonal TC-1) al antigeno excretor-secretor larvario 4.5.4.4.1.1.- Mediante E.L.í.S.A. a) Competición con el anticuerpo idiotipico a distintas concentraciones 435
436 CM .0 CM —-u 0.) e- U E o CCOO O~e O - ‘74 ¡e • r U - ‘ E D e 00 De-e íd n mee E Cf) O) • e ‘0 C m e>’ . -rl ‘-e DC)) - -OC> $4 “u- C U) a. -n Li.’ - - A u-. .UJ o .~ o • u (J> ‘ a, ‘D E -~ —1- -~ — e U> C ~j ¿= ¿c ¿U? .0 ~ $4 Ci E o ci ¡e E ce ce e¿ íd ‘4 tuctu • 0,0 —I~ • •, 0,0 -1- — (U E o íd Ca o E o E o a ‘4 o> D U -r4 E ca -e 0> -D E ‘o -rl Ci a, $4 43 E0> e> N u, 0 — s ¿ ¿•0 C Ceo ~ ~1 o ~ ¿:¿c;eo r e -~ e ~e o’.e’ucaeo e> 0000 0 ‘rl ~O 43 E e> U> e..’ e> 11 ca rHr.4 ca (u -4 o 0>1 -rl PC.) $4 Ce.— o ca a> > -rlíd -rl ‘4 -oca 43 tu E E -rl rl 00 Ca O $4 Coca a o o,o 4) $4E eH a> ‘40 O $4 DE ‘e U U .43 a> o E Ca (a a O 1 r-4’e U ‘4 0> O 04) cao E 03 43-rl ‘rl $4 Co43 $4 Ci ~ $4 ca E a’ 0> rl O O - -D 0> ‘e E C -D 0> a> • Co D O) Cf) ~> E Cf) ‘.4 - D’D 4) m o..rl E Ca E tu (a a’ D + íd -D íd a> E O 4-5 4) 0 a> ). E E ‘rl 0> 0> 0> E .4-5 ‘4 ‘e -D ‘o ca “4-4 ~4-4 -rl O’ Co ca0 Co (a O -rl O E U Ci -rl fl ‘4 H rb -c -rl uíd 43 -4., a> r ‘4 o a a E E ‘4 ‘0 ‘0 -rl e -4., Ca E 0 -D 0> 0> 0 o tu ca ‘4 -n -D U ~O 0 O CD H -rl rl a, O) o Co Co ca -n E E E >• -rl a> 0) 4) E $4 O O e¡ E O 2 wO ~- O ~. 12 - e .iíre e o tu O cd ¡-e 0> a Le) o ca o ‘4 -rl 43 o- 14.4 E ¡ 4) ‘0 O rl •H U ~-0 D ~rl cd e ‘rl - —r e . ~ - ~ o c,jiI:~ •e - ~ ~ 0e0 •~ - -ni re ~ • 2 a> ou E o o, D 2: - INNJt.J o oe~ oo O le, rl 12 &i e 1 1— D 2: e— ca o-tu C $4 -J4-) m Co C a> e-e o — CC., e— — ~ —.I~. e’u- (01W ~ 1Lfl o rl ca 010 ,4 N1N (‘eN O C~0 CeO CO e> O O o alo ceo• 00 e’- 0> - ‘ ‘coree! ~L e e rn o ¿I¿¿e0 e e o ~ ¿¡0 • • o — ~ --4e CeO .1 re o¿ CM e e ~- --4- U e”.’ -rl rl rl 03 -rl ‘op D o ca $4 ti) .0) rl ca rl Co $4 a> a, E E -rl E $4 D o-rl o íd Ca ‘o ‘e o o, a 4) rl o 1— 1-It.) Ceo o m’ca N¡C.J •1 e>. o o o - tu e> - —r- -eH-- — — o —r- o~t ~ rl ~‘ONO ce New ¿Co ~flre oeo -4-- ce, I~e, ob rl (‘> r rl (‘4 — ws ~ NIC’J U> ~-1~; ~-i~ o • ¡ U Ne CO u, re e>O ru-•— ~Jte~t4N Ceo oCo ca (‘4 r o r rl O a, >, -H (U 1> C~) $4 E CD 0> o. íd 0> -e E o 0> a> o E -o o (U o u rl O- ‘rl -e., o -rl -D -rl o a ‘e a> D ca -rl .4> EIV E a, U) rl •4) m c CD a> (U E 4) íd E íd E 0) D a> (u - -~- r c ce, o’S~ 41¿ e -t-m %e~ ¿e~ e e’. ~ ci, .4 •~ - re 1 O O~ O tu- N~W re 1- e-e ce, rl tu t~. O e CM o rl -o Cl> E Ci ‘0 -rl ‘rl 4.* U ‘rl D $4 1 D ‘rl ‘e o 4) a> $4 Ci a> o c a’ -O) $4 o -4., a> $4 ca a> Ca $4 ca íd o ‘rl $4 (a
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UNIVERSIDAD COMPLUTENSE FACULTAD DE
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III A mis padres. A Antonio.
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A mi marido, quien ha vivido muy de
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VIII
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2.12.1.1.- Técnicas que detectan l
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á.¿.20.3.2.—. Inducción de la
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6.- CONCLUSIONES • 527 7.- BIBLIO
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sobradamente conocida entre los ni
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lo tanto permita normalizar los res
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2.2. - HORFOLOGIA 2.2.1.— BUEVOS
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El extremo posterior de la larva es
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inmunoenzimática, observan en real
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2.3.- CICLO BIOLOGICO En el caso de
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de los productos de excreción—se
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2.3.3 . - CICLO EN EL HOSPEDADOR PA
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AUTOR AÑO América del Norte Anvyk
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AUTOR Umar y col. Umar y col. Choo
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AUTOR AÑO PAíS Icucharova Hindsbo
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AUTOR Welch y col. Boreham y Capron
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AUTOR América del Ohadirian y col.
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Tholer y col. Horchner y col. EUROP
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Gorash y Alekseeva Gorash y Aleksee
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CYPESS y col. (1.977’>, GLICKMAN
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VEGNI TALLURI y col. (1.986) obtien
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A pesar de ser las soluciones de fo
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Se ha visto sometido a diversas mod
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HERLICH (1.956) utiliza un método
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ABDEL—HAMEED (1.984 a, b) utiliza
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PARSONS y GRIEVE (1.990, a) estudia
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migratorio de larvas parásitas. Si
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y T 2 en los tejidos del hospedador
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2.8. - MIGRAGION LARVARIA EN ANIMAL
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tercer día p.i., siendo 132 larvas
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- En cerebro, la mayor cantidad de
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- En pulmones recuperan 7,6 +1- 3,7
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inoculado con 5.000 huevos infestan
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sacrificando los animales a los cin
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la cepa donante (CBA——SJL 80 tI
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caso de cerebro entre dos portaobje
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OAKS Y RAYES (1.979), tras decortic
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pH 7,2, a temperatura ambiente y en
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SMITH (1.989) incuba los huevos de
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CONCEPCION y BARRIGA (1.985) obtien
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SMITH y col. (1.983, c) lavan adult
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SUGANE y OSHIMA (1.984, b) introduc
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técnica es utilizada por CONDE—G
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La localización del idiotopo diana
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Freund, con intervalos de dos seman
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la segunda adyuvante incompleto de
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2.12.- INMTJNTDAD 2.12.1.- TEGNICAS
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LUXES y PROKOPIG (1.984) investigan
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SUGANE y OSHIMA (1.984. a) investig
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WELCH y DOBSON (1.978) y WELCH y co
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concentración de antígeno de 2,5
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ug/ml y considerando positivos los
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entre x +/— 2a y x ~1— 4o, es d
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SAVTGNY y col. (1.979): los sueros
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añaden los sueros diluidos en P.B.
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positivos aquellos sueros que provo
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2.12.1.1.3.- Detección de antígen
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tras la estimulación con antígeno
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doce semanas después de la inocula
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anticuerpos, aunque si tienen nivel
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después, bien por aclaramiento, bi
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La respuesta celular frente a T.can
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celular (fundamentalmente neutrófi
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por separado, por implantación de
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ásitos, pero la prevalencia de dis
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larvas en el músculo en función d
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p.r. y que para esta cepa la dosis
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2.12.3.1.1.3.— Protección median
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De estas experiencias deducen que e
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PREEt4AN y col. (1.980), en un estu
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para destruir los parásitos “in
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inmunizados y células de mieloma N
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2.13. - TRATAMIENTO 2.13. 1.- TRATA
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educe la colonización larvaria en
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Con la dosis más baja de ivermecti
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1120—lISO, a las 2-3 semanas p.i.
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FANNINO y col. (1.981) describen el
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STURCHLER y col. (1.989) describen
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las formas clínicas de T.O. acompa
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3.- MATERIAL Y METODOS 3 .1. - MATE
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3.1.1.8.— SUEROS 3.1.1.8.1.- Suer
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* Tamiz diámetro de malla 0,063 m/
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Glucosa • í g CO HNa 0,35 g 3 de
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d) SOLUCION DE VERDE MALAQUITA Verd
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) P.B.S.-TWEEN 20 Tween 20 0,5 ml P
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d) TAMPON CITRATO 1 M pH 3,5 Acido
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* ULTRAQEL ACA-44 * AZIDA SODICA *
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179 rl .74 tu .0 C 1 .74 tu 4.4 ‘
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3.2.- METODOS 3.2.1.- ORTENCION DE
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Los huevos se filtraron por doble g
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linfocitos. b) — Inmediatamente c
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e) — Dispersar la pasta en 7 ml d
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) — Añadir 0.1 mi de la dilució
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Día O Esquema 1 Pauta de inmunizac
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polietilénglicol 6.000, disuelto e
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trituradora, completando el volúme
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3.2.12.- OBTENGION DE SANGRE Y SIJF
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3.2.14.3.— PRODtJCCION DE ASCITIS
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adecuado. i) — Dializar frente a
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Lavar tres veces con P.B.S.—Tween
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Nota: Una porción de la placa se u
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a) - Preparar una solución de peps
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3,2.19.3.- ELECTROFORESIS EN GELES
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c) — Rellenar el resto de cada po
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Esquema II Patita de inmunización
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ti) — Lavar con tampón de acopia
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f) - Aplicar la muestra sobre el ge
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La metodología seguida en el prime
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* pocas larvas con precipitados. 1
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a la dilución 1/100 en P.B.S.—Tw
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3.2.21.2.- COI4PA.RACION DE DOS MUE
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227 ci, (44 -4 = 44 ea> c w u — 0
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RESULTADOS 229
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4.- RESULTADOS 4.1.- ESTUDIO DE LA
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1 o = Organo R = Ratón TABLA IV BA
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o = Organo R = Ratón TABLA VIII BA
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237 II II ~.J á~ o o I>< h< C u a>
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O = Organo A Ratón TABLA XIV C5YBL
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o = Organo R = Ratón TABLA XVIII C
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O = Organo R = Ratón TABLA XXII C5
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4.1.1.3.- TRATAMIENTO ESTADíSTICO
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Día 4 p.i MIGADO (% Li PULMONES (%
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Día ‘1 p.i - HIGABO
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Día 63 p.i - MIGADO 1% U PULMONES
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‘o 8 6 4 2 o % LARVAS FIGURA 3 2
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4.1.2. - SELECCIOW DE ORGANOS MAS R
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1 TABLA XXVIII BALB/c 59 día p.i
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n TABLA XXXII BALB/c 212 día p.i o
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~ ~ TABLA XXXVI BALE/o CUADRO RESUM
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R TABLA C5ZEL/1O XXXVIII 39 día p.
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R a> TABLA XLII C57BL/1O 1O~ día p
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R R R. TABLA XLVI C579L/1~ 492 día
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4.1.2.3.- TRATAMIENTO ESTADISTICO D
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Día 4 p.i MIGADO 1% Li - PULMONES
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Día ~7p.i HíGADO
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Día 15 pi MIGADO (t U - PULMONES (
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Día 35 p.i - BIGALO (% L PULMONES
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80 60 40 20 o 60 50 40 30 20 10 o %
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4.1.2.5w- AMPLIACION CRONOLOGICA DE
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TRATAMIENTO ESTADíSTICO Cepa BALB/
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4.1.4.- RESPUESTA INMUNITARIA EOSIN
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4.2. - TRATAMIENTO CON NEBENDAZOL 4
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cl cl ti, u, 2: o .2 O. o O Li ‘o
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- HíGADO it Li - PULMONES (ti CANA
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MIGADO (% L} - PULMONES (% L CANAL
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- HíGADO it U - PULMONES
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Lpte Lote Lote Lote Lote Lote Lote
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42.l.2,2.- Lote lib: Mebendazol Com
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4.2.1.2.3-- Lote IIIb: Mebendazol e
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TABLA LXIX Lote VIb: MHZ d.c. (50 m
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TABLA LXX Lote VIIb: MB? ds. (25 mg
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TABLA LXXXV Lote VIIb: MHZ d.s. (25
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Page 485 and 486: e TABLA CXXXIX 9 3 Sueru + ‘*4 Su
Page 487 and 488: 464 5 -— - OK en ej a,,, - a~¿ -
Page 489 and 490: 1,5 FIGURA 83 Titulación TC-1 conj
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Page 493 and 494: 470 o e — ~ OCO ~ Oto O- e —
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Page 499 and 500: BALB/c (50%), pero en este modelo s
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Page 503 and 504: En la recuperación larvaria del ce
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La distribución larvaria por órga
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5. 14 - - RESPUESTA INNUNITARIA EOS
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ién fue mucho más brusca para PRZ
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5. LS. - RESPUESTA INMUNITARIA HUMO
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formulación galénica que permite
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ien si las retiene evitando que lle
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administrado durante cuatro semanas
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522. - EVALTJACION MEDIANTE ESTUDIO
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control los anticuerpos frente al a
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desaparición casi inmediata de la
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(sexta semana de la experiencia) cu
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La única referencia bibliográfica
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14,43%), en el porcentaje larvario
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En el caso de la toxocarosis, nuest
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anticuerpo monoclonal con sulfato a
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correspondiente (TC—l) y frente a
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E.L.I.S.A. y microprecipiriación l
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microprecipítación. Por otra part
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esultados obtenidos con dos sueros
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De ambos trabajos- podemos concluir
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6) - La evaluación del tratamiento
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using gut tissue extracta and sorne
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‘BOYCE, W.N.; ASAI, D.J.; WILDER,
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a rnouse model. ‘Jet. Inunol. Ium
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as intermediate bosta. British ‘J
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‘GLICKAMN, LI.; SOMANIZ, PM.; Orn
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-FI- ‘HAGLER, LS.; POLLARD, ti.;
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‘JOVANOVIO, 14. (1.964),- The pro
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observation of excretory ceil of To
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Iber. Parasitol. 39: 191—201. ‘
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941. ‘OLSON, L.J.; ECMULZ, CV. (1
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(4>: 441—443. ‘PROCIV, P. .- Ob
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‘SACRE, D.L.; ESSER, KM.; EMIR, A
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‘ENON, RE.; BALL, S.J.; BEN¡CR,
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-tJ- ‘lIGA, 8.; MATSURURA, T.; AO
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Toxocariosis lo tbe Sudan. Ann. Tro
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CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

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