CONTRIBUCION A LA BIOLOGIA E INMUNOLOGIA DE Toxocara ...

Los huevos se filtraron por doble gasa, para eliminar los restos de útero y
se concentraron por centrifugación a 1.500 r.p.m. durante cinco minutos,
lavándose posteriormente con solución salina ésteril.
3.2.2. - EHBRIONAHIENTO DE HUEVOS
Tanto los huevos obtenidos de heces como los procedentes de hembras
grávidas, se sometieron a la misma pauta.
Una vez limpios, se lavaron cinco veces con solución salina estéril al
0,85%. Después se sometieron a la acción de cloruro de benzalconio al 4%
durante 15 minutos, o mertiolato el mismo tiempo, con objeto de eliminar
las posibles bacterias y esporas de hongos. A continuación se lavaron otras
cinco veces con solución salina estéril y se dispusieron en placa de Petri,
utilizando como medio de embrionamiento, solución salina estéril al 0,85%
(unos 20 ml por placa).
Se añadieron unos 200.000 huevos por placa y se incubaron a 379C en
estufa, bajo las condiciones adecuadas (acción del ciclo luminoso natural,
GUILLEN y col, 1.986, b) y oxigenación del medio mediante agitación peno-
dica. Añadimos al medio aproximadamente cuatro gotas de gentamicina al 0,4%
y la misma cantidad de nistatina para evitar posteriores contaminaciones.
El tiempo de embrionamiento necesario en estas condiciones es de 32 días
(GUILLEN y col. 1.986, b).
3.2.3.- ORTENCION DE LARVAS
Una vez que los huevos alcanzaron el estadio infestante, se provocó la
eclosión por un método mecánico, ya que los huevos de T.canís son incapaces
de eclosionar de forma espontanea.
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