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a microonde in tampone citrato a pH 6 e tampone EDTA a pH
8. Le condizioni di ibridazione ed i lavaggi di stringenza sono
stati eseguiti rispettando le indicazioni delle case di produzione
delle sonde.
Risultati. Le 40 neoplasie presentavano una espressione variabile
della proteina Cerb-B2 10 delle quali score 0, 7 score
1; 15 score 2; 8 score 3 (score Herceptest Dako). La valutazione
con le sonde Pathvysion Vysis ed HER2DAKO, seguendo
le procedure di pre-trattamento suggerite dalle case
di produzione hanno dato risultati comparabili dimostrando
l’assenza di amplificazione negli score 0, 1 e nell’86,7% degli
score 2 (13 casi non amplificati, 2 casi amplificati) una
marcata amplificazione genica con clusters negli score 3+. Il
pre-trattamento nel forno a microonde in citrato pH6, pur fornendo
dei risultati pressoché comparabili, produceva in alcuni
casi (10 su 40) artefatti nucleari che rendevano difficoltosa
la lettura. Il pre-trattamento nel forno a microonde in ED-
TA pH8 forniva risultati concordi con quelli eseguiti secondo
le istruzioni del produttore della sonda. Inoltre la conservazione
dell’architettura del tessuto e l’assenza di artefatti nucleari
facilitavano l’osservazione sia diretta che le riprese fotografiche
per la conta automatica degli spot.
Conclusioni. Il pre-trattamento con il calore in EDTA, da noi
messo a punto, ha rappresentato un buon compromesso tra
permeabilizzazione e conservazione della morfologia nucleare.
Va sottolineato che il pre-trattamento a microonde ha consentito
di applicare a diverse neoplasie lo stesso protocollo
con risultati equiparabili a quelli ottenuti variando i tempi di
digestione enzimatica.
Correlazioni tra flat atypia e patologia
benigna e maligna della mammella
S. Battista, E. Bonanno, D. Liotti, D. Postorivo, L.G. Spagnoli
Università “Tor Vergata”, Roma
Introduzione. Il termine “flat atypia” si riferisce a lesioni
delle unità duttale-terminolobulare in cui acini variabilmente
dilatati sono rivestiti da uno o più strati di cellule epiteliali
colonnari con atipia citologica di basso grado. Secondo Azzopardi
era una forma DCIS (clinging carcinoma). Oggi la
WHO l’ha classificata come una lesione proliferativa intraduttale,
DIN1a, che comprende: alterazioni delle cellule colonnari
con atipia (acini rivestiti da uno o due strati di cellule
colonnari epiteliali con vacuoli citoplasmatici apicali, calcificazioni
luminali o psammoma bodies); iperplasia delle
cellule colonnari con atipia (acini rivestiti da più di due strati
di cellule epiteliali colonnari che possono formare protrusioni
o micropapille con aspetto hobnail). L’atipia è di basso
grado con nuclei rotondi od ovali non regolarmente orientati
perpendicolarmente alla membrana basale, con aumentato
rapporto nucleo/citoplasma e nucleoli prominenti. L’obiettivo
del nostro studio è di correlare tali lesioni al DCIS e al
Carcinoma Duttale Infiltrante per migliorare le strategie terapeutiche
di pazienti, abbiamo valutato reperti chirurgici di
nodulectomia, quadrantectomia e mastectomia radicale la
possibile relazione.
Metodi. Abbiamo esaminato un totale di 337 casi, in reperti
chirurgici di nodulectomia, quadrantectomia e mastectomia
radicale, inclusi in paraffina e colorati con ematossilina-eosina,
di patologia mammaria suddivisa in benigna (fibroadenoma,
mastopatia fibrosocistica, iperplasia e papillomatosi intraduttale,
adenosi, altre patologie) rispettivamente corri-
spondente a 180 casi e maligna corrispondente a 157 casi di
carcinoma duttale e lobulare infiltrante (DCI, LCI) di carcinoma
duttale e lobulare in situ (DCIS, LCIS).
Risultati. Dei 180 casi di patologia benigna, solo 33 erano
associati alla “flat atypia” ed erano mastopatia fibrosocistica
(18,3%). Tra i 157 casi di patologia maligna, 115 erano DCI,
di cui 27 con “flat atypia”; 42 erano DCIS di cui 6 con “flat
atypia” (21%).
Conclusioni. Dal nostro studio la “flat atypia” risulta essere
correlata al carcinoma in situ ed infiltrante, piuttosto che alla
patologia benigna, peraltro rappresentata da una maggioranza
di casi di mastopatia fibrosocistica. Questo dato risulterebbe
importante nel management agobioptico delle pazienti
per non incorrere nel overtrattamento e nella sottostadiazione.
Bibliografia
1 Schnitt SJ. Breast Cancer Res 2003;5:263-8.
2 Schnitt SJ, et al. Modern Pathol 2006;19:172-9.
POSTERS
Amyloid beta protein precursor and vascular
endothelial growth factor expression in
breast carcinoma correlates with
angiogenesis and prognosis
L. Marasà, R. Passantino, S. Marasà
U.O. Anatomia Patologica, P.O. “M. Ascoli”, Palermo, Italia
Introduction. Angiogenesis is essential for tumour growth
and important in tumour metastasis and prognosis. The amyloid
beta protein precursor (APP), cleaved by β-secretase and
γ-secretase to produce β-amyloid, is highly expressed in the
endothelium of neoforming vessels suggesting that it might
play a role during angiogenesis. So far APP expression has
been correlated with high vascularity and malignant progression
of human astrocytic tumours and, recently, oral squamous
cell carcinoma. Vascular endothelial growth factor
(VEGF) stimulates endothelial proliferation in vitro and angiogenesis
in vivo. VEGF expression has been correlated
with high vascularity in tumours, including breast carcinoma.
Methods. This study investigated APP and VEGF expression
in invasive lobular (n = 10) and invasive ductal breast carcinoma
(n = 20). APP and VEGF expression was studied with
immunohistochemistry using monoclonal antibodies on fivemicron
thick sections obtained from formalin-fixed, paraffinembedded
tissue blocks. The sections were also stained with
antibodies against factor VIII, CD31 and CD34. APP and
VEGF staining was evaluated by combining both percentage
of positive tumour cells and staining intensity. Angiogenesis
was moreover estimated as Microscopic Angiogenesis Grading
System (MAGS) index and Microvessel Density (MVD).
Results. Immunohistochemistry demonstrated that APP was
detectable mainly in tumour and endothelial cells. There was
more expression of VEGF in invasive ductal than in invasive
lobular carcinoma. APP and VEGF expression correlated
with a poor prognosis.
Conclusions. This is the first study that has investigated the
role of APP in angiogenesis in breast cancer suggesting a
probable participation of APP and the possibility to use the
inhibitors of the β- and γ-secretases such as new classes of
anti-angiogenic and anti-tumoral drugs. Our preliminary results
have confirmed the role of VEGF in angiogenesis in
breast cancer and the different expression of VEGF in invasive
ductal and lobular carcinoma suggesting that other fac-