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rappresentare un nuovo target per una terapia molecolare
“mirata”.
Bibliografia
1 Zagzag D, et al. Cancer Res 2005;65:6178-88.
Mutational analysis of the PIK3CA gene in
breast carcinomas: different prognostic role
of mutations in the helical and kinase
domains
F. Buttitta, L. Felicioni, S. Cotrupi * , M. Del Granmastro,
F. Barassi, A. Ferro ** , P. Dalla Palma * , E. Galligioni ** , A.
Marchetti, M. Barbareschi *
Clinical Research Center, Center of Excellence on Aging,
University-Foundation, Chieti, Italy; * Unit of Surgical
Pathology, Laboratory of Molecular Pathology, “S. Chiara”
Hospital, Trento, Italy; ** Unit of Medical Oncology, “S.
Chiara” Hospital, Trento, Italy
Introduction. Mutations in the PIK3CA gene, coding for the
PI3K catalytic subunit, are among the most frequent mutational
events in breast cancer. The PI3K-AKT pathway plays
a fundamental role in signal transduction following tyrosine
kinase growth factor receptor (TKGFR) activation. We and
others have previously reported that the PIK3CA gene is frequently
mutated at “hot spots” in exons 9 and 20, corresponding
to the helical and kinase domain respectively. In
this study, we decided to investigate the association of
PIK3CA mutations with pathological and biological features
and clinical outcome in a large series of consecutive primary
infiltrating breast carcinomas.
Methods. Frozen samples of primary infiltrating breast carcinomas
from 163 consecutive patients with complete pathological
and clinical data were analyzed for mutations in exon
9 and 20 of the PIK3CA gene using SSCP and direct sequence
of PCR products.
Results. We identified 45 missense mutations, 24 (53%) in
exon 9 and 21 (47%) in exon 20. Twelve (50%) of the 24 mutations
in exon 9 were of the E542K type and 11 (46%) were
of the E545K type. Twenty (95%) of the 21 mutations in exon
20 were H1047R substitutions. Mutations in exon 9 were
more frequent in lobular carcinomas (42% of cases) than in
ductal carcinoma (11% of cases) (p = 0.002). At univariate
survival analysis PIK3CA exon 20 mutations were associated
with prolonged overall (OS) and disease free survival (DFS)
while mutations in exon 9 were associated with significantly
worse prognosis. At multivariate analysis exon 9 PIK3CA
mutations were the strongest independent factor to predict
poor prognosis for DFS (P = 0.0003) and OS (P = 0.001).
Conclusions. Exon 9 PIK3CA mutations are typical of infiltrating
lobular carcinomas. PIK3CA mutations in different
exons are of different prognostic value: exon 9 mutations are
independently associated with early recurrence and death,
while exon 20 PIK3CA mutations are associated with optimal
prognosis.
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Alterazioni dell’espressione di geni del ciclo
cellulare nel mesotelioma maligno pleurico
S. Romagnoli, V. Vaira, M. Falleni, E. Fasoli, C. Pellegrini,
L. Santambrogio * , S. Bosari, G. Coggi
Università di Milano, Dipartimento di Medicina, Chirurgia,
Odontoiatria, e A.O. “San Paolo”, Fondazione IRCCS,
Ospedale Maggiore Policlinico “Mangiagalli e Regina Elena”,
Milano; * Università di Milano e Dipartimento di Chirurgia
Toracica, Fondazione IRCCS, Ospedale Maggiore
Policlinico “Mangiagalli e Regina Elena”, Milano
Introduzione. Il mesotelioma è una neoplasia a pessima
prognosi e con crescente incidenza nel mondo. Alterazioni
dei geni coinvolti nel controllo del ciclo cellulare sono stati
evidenziati in precedenti studi: perdita di espressione di
p14 INK4a , alterata espressione di p27 e p21, delezioni di p16,
iperespressione di Aurora kinasi A e B.
Il presente studio ha l’obiettivo di analizzare l’espressione di
60 geni coinvolti nel controllo del ciclo cellulare in 45 pazienti
con mesotelioma, mediante tecnica “Microfluidic card”.
Materiali e metodi. Sono stati raccolti e appropriatamente
congelati campioni di 45 pazienti portatori rispettivamente di
30 mesoteliomi epitelioidi, 5 mesoteliomi sarcomatoidi e 10
mesoteliomi bifasici.
Sono state inoltre analizzate due linee cellulari di mesotelioma,
MSTO-211H e NCI-H2452, una linea cellulare di
mesotelio immortalizzato (Met5a) e come controparte non
neoplastica cinque pleure normali. L’RNA estratto dai campioni
è stato retrotrascritto e caricato su Microfluidic card
contenente primers e sonde per 60 geni del ciclo cellulare opportunamente
selezionati (“assay-on-demand”), 4 geni
housekeeping. Le card sono state analizzate mediante ABI
Prism 7900HT Sequence Detection System. I geni sono stati
considerati differenzialmente espressi se presentavano entrambe
le seguenti condizioni: a) un rapporto di espressione
in tessuti tumorali e normali > 2 (Fold change-FC > 2) o minore
di 0,5 (FC 0,5); b) un p value al T test < 0,01.
Risultati. Quarantacinque geni mostrano una maggiore
espressione nei tumori rispetto alle pleure normali, mentre
quattordici geni risultano ipo-espressi nel tumore rispetto al
normale. Diciannove geni hanno evidenziato un FC K/N > 2
o < 0,5 ma solo nove geni mostrano un T test < 0,01: Check1,
CCNH, Ciclina B1, P18 (CDKN2), ciclina D2, Ube1L,
CDC2, FOXM1, CDC6. Inoltre, l’espressione di Ube1l ha
evidenziato una correlazione con l’istotipo, denotando una
upregolazione nei mesoteliomi epitelioidi.
Conclusioni. Alcuni geni per lo più concentrati nella progressione
tra la fase S e la fase M del ciclo cellulare risultano
differenzialmente espressi nel mesotelioma. Tali geni potrebbero
avere un ruolo nella progressione e prognosi della neoplasia.
Inoltre ulteriori studi dovranno accertare il significato
biologico del loro silenziamento come possibile atto terapeutico.