Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...

Ergebnisse
Zum Zeitpunkt 0 h war die Expression alle drei Homologen nachweisbar, nach 12 h konnte
keine Expression mehr detektiert werden. Im Falle der Kultivierung von YN/p416YCR-HA
und YN/p416YNR-HA war nach 18 h keine Glucose im Medium mehr vorhanden. Zu diesem
Zeitpunkt wurde Ynr002cp-HA wieder exprimiert, die Bildung von Ycr002cp-HA konnte etwas
später (nach 20 h) nachgewiesen werden.
Wurden die Hauptkulturen mit einer OD600 von 1,4 angeimpft, so konnten diese Ergebnisse
bestätigt werden (Daten nicht gezeigt). Zum Zeitpunkt 0 h konnten ebenfalls Expressionen
nachgewiesen werden, nach 12 h war keine Expression der HA-getagten Proteine mehr vorhanden.
Allerdings kam es aufgrund der höheren Zellzahl im Medium zu einem schnelleren
Verbrauch der Glucose, und die Expression der Homologen war eher nachweisbar. Nach
16 h war keine Glucose mehr im Medium nachweisbar, Ycr010cp-HA und Ynr002cp-HA
wurden ab diesem Zeitpunkt bis 24 h exprimiert. Die Expression von Ydr384cp-HA war nicht
nur von der zur Verfügung stehenden Glucose, sondern auch von der Wachstumsphase abhängig
(Abb. 30).
Wurde die Hauptkultur mit einer OD600 von 0,7 angeimpft, so konnte zum Zeitpunkt 0 und
nach 22 – 24 h eine Expression von Ydr384cp-HA nachgewiesen werden. Glucose war ab
22 h nicht mehr im Medium nachweisbar. Beträgt die Start-OD600 dagegen 1,4 so konnte
nach 0 und 16 – 20 h eine Expression detektiert werden, danach war keine Expression mehr
nachweisbar. Die Glucose war nach 18 h im Medium verbraucht. Daraus lässt sich schlussfolgern,
dass das Ydr384c-Protein kurz nach dem Beginn der stationären Phase wieder gebildet
wurde, allerdings nur für einen kurzen Zeitraum (4 bis 5 h).
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