Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...
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Material und Methoden<br />
Minimalmedium für S. cerevisiae (M)<br />
Das Minimalmedium für S. cerevisiae setzte sich aus Rea<strong>der</strong>salzen, Spurenelementen, Eisenchlorid-Lösung,<br />
Vitaminen, C-Quelle und eventuellen Supplementen zusammen.<br />
10 x Rea<strong>der</strong>salze: Ca(NO3)2 x 4 H2O 4 g/l<br />
KH2PO4 10 g/l<br />
K2HPO4 x 3 H2O 1,6 g/l<br />
MgSO4 x 7 H2O 7 g/l<br />
NaCl 5 g/l<br />
(NH4)2SO4 30 g/l<br />
1000fache Spurenelemente-SL: CuSO4 x 5 H2O 40 mg/l<br />
H3BO3 500 mg/l<br />
KI 100 mg/l<br />
MnSO4 x 4H2O 400 mg/l<br />
Na2MoO4 200 mg/l<br />
ZnSO4 x 7 H2O 400 mg/l<br />
5000fache Eisen(III)chlorid-SL: FeCl3 x 6H2O<br />
in Ethanol lösen<br />
30 g/l<br />
100fache Vitamin-SL: Biotin 2 mg/l<br />
Calciumpantothenat 400 mg/l<br />
Folsäure 2 mg/l<br />
Inositol 2 g/l<br />
p-Aminobenzoesäure 200 mg/l<br />
Pyridoxin x HCl 400 mg/l<br />
Riboflavin 200 mg/l<br />
Thiaminhydrochlorid 400 mg/l<br />
Niacin 400 mg/l<br />
Supplemente (100fach): L-Histidin 2 g/l<br />
L-Leucin 10 g/l<br />
L-Lysin 2 g/l<br />
L-Methionin 5 g/l<br />
L-Tryptophan 2 g/l<br />
Uracil 2 g/l<br />
Kohlenstoffquellen: Endkonzentrationen im Medium<br />
Ethanol 2 % (v/v)<br />
Glucose 2 % (w/v)<br />
Natriumacetat 30 mM<br />
Glucose wurde autoklaviert, Natriumacetat dagegen steril filtriert. Der pH-Wert <strong>von</strong> Natriumacetat<br />
wurde mit Salzsäure je nach Bedarf auf pH4, pH5,5 o<strong>der</strong> pH6 eingestellt.<br />
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