Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...

Ergebnisse
rial zur Proteinpräparation) wurden Hauptkulturen, die zur Probennahme für die Western-
Blot-Analysen dienten, mit einer höheren OD600 von 0,7 bzw. 1,4 gestartet.
3.3.13.1 Expressionsverlauf in Minimalmedium mit Glucose
Am Beginn der Untersuchungen der Expression der GPR1-Orthomologen YCR010c,
YDR384c und YNR002c stellte sich die Frage, wie der Verlauf der Expressionen während
des Wachstums der Zellen auf Minimalmedium mit Glucose ist. Dies wurde mittels eines
Northern-Blots überprüft, dessen Ergebnis in Abb. 27 dargestellt ist.
A
B
YCR010c
YDR384c
YNR002c
18S RNA
OD600
3
2,5
2
1,5
1
0,5
0
Wachstum auf Minimalmedium mit Glucose
0 5 10 15 20 25
Zeit in Stunden
a b c d e f g h i k l m n
Abb. 27: Expression von YCR010c, YDR384c und YNR002c im Stamm YN während der
Kultivierung in Minimalmedium mit Glucose als C-Quelle. Die Vorkultur wurde üN
in MG-Flüssigmedim geschüttelt, einmal mit 1 x Readersalzen gewaschen und
die Hauptkultur mit einer OD600 von 0,1 angeimpft. Zu den angegebenen Zeitpunkten
[a) 0 h, b) 0,5 h, c) 1 h, d) 1,5 h, e) 2 h, f) 2,5 h, g) 3 h, h) 4 h, i) 6 h, k) 8 h, l)
10 h, m) 12 h, n) 24 h] wurden 30 - 50 ml Probe genommen, die Zellen abzentrifugiert
und die RNA präpariert. In A) ist die Wachstumskurve und in B) die entwickelten
Northern-Blots dargestellt. Der Pfeil markiert den Zeitpunkt der Abnahme
der Expression von YDR384c.
YN
Abnahme der Expression
von YDR384c
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