Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...
Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...
Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...
Erfolgreiche ePaper selbst erstellen
Machen Sie aus Ihren PDF Publikationen ein blätterbares Flipbook mit unserer einzigartigen Google optimierten e-Paper Software.
7 Anlagen<br />
7.1 Plasmidkarten<br />
In den folgenden Abbildungen sind ausgewählte Plasmide dargestellt.<br />
NcoI, 9440<br />
PstI, 9057<br />
KpnI, 187<br />
XhoI, 305<br />
SplI, 431 HindIII, 996<br />
EcoRI, 8467<br />
SalI, 8333<br />
NruI, 8012<br />
LTR<br />
GPR1-1<br />
ClaI, 1002<br />
EcoRI, 1027<br />
Kpn2I, 7320<br />
ROP<br />
ORI<br />
8000<br />
6000<br />
PstI, 5377<br />
pYLD103<br />
Amp r<br />
Amp r<br />
Amp r<br />
9487 bps<br />
4000<br />
EcoRI,4625<br />
2000<br />
CEN-ARS18<br />
LEU2<br />
HindIII, 3827<br />
XhoI, 1973<br />
EcoRI, 1990<br />
XhoI, 2002<br />
ApaI, 2549<br />
NcoI, 3049<br />
SphI, 3283<br />
Abb. 54: Das Plasmid pYLD103 enthält<br />
das GPR1-1-Allel aus dem Stamm B204-<br />
12C-112.<br />
Amp r<br />
Amp r<br />
Amp r<br />
5000<br />
4000<br />
6000<br />
HindIII, 426<br />
SacI, 6334 ClaI, 432<br />
SalI, 441<br />
XhoI, 447<br />
pMet25<br />
CYC1ter<br />
p426MET25<br />
6338 bps<br />
3000<br />
XbaI, 3146<br />
1000<br />
2000<br />
URA3<br />
KpnI, 710<br />
NcoI, 2092<br />
EcoRV, 2111<br />
PstI, 2319<br />
NdeI, 2385<br />
384<br />
XbaI<br />
SpeI<br />
BamHI<br />
SmaI<br />
XmaI<br />
EcoRI<br />
414<br />
Abb. 56: Das Plasmid p426MET25 diente<br />
zur Expression <strong>von</strong> verschiedenen GPR1-<br />
Allelen sowie YCR010c- und YNR002c-<br />
Allelen unter Kontrolle des MET25-<br />
Promotors in <strong>der</strong> Hefe S. cerevisiae.<br />
PstI, 8612<br />
PvuI, 8486<br />
ScaI, 8375<br />
BspEI, 10555<br />
BsaAI, 9994<br />
NdeI, 9924<br />
HindIII, 7062<br />
Amp r<br />
Amp r<br />
Amp r<br />
SalI, 11568<br />
PshAI, 11503<br />
NruI, 11247<br />
ORI ROP<br />
ORI ROP<br />
ORI ROP<br />
8000<br />
SphI, 6518<br />
10000<br />
CEN-ARS18<br />
pYLG2<br />
11568 bps<br />
6000<br />
BamHI, 447<br />
2000<br />
4000<br />
LEU2<br />
Bsu36I, 5081<br />
SgrAI, 5548<br />
ApaI, 5784<br />
Bsp120I, 5784<br />
GPR1-2<br />
Anlagen<br />
BglII, 1297<br />
NheI, 2445<br />
KpnI, 3422<br />
BstEII, 3467<br />
SplI, 3666<br />
HindIII, 4231<br />
Abb. 55: Das Plasmid pYLG2 enthält den<br />
ORF des GPR1-2-Allels unter Kontrolle<br />
des GPR1B-Promotors aus dem Stamm<br />
PO1d.<br />
Amp r<br />
Amp r<br />
Amp r<br />
5000<br />
4000<br />
p416YCR<br />
6424 bps<br />
CEN6/ARSH4<br />
PstI, 126<br />
SacI, 6420<br />
BglII, 341<br />
XhoII, 341<br />
HincII, 434<br />
SalI, 434<br />
pYCR010c<br />
KpnI, 712<br />
HincII, 792<br />
KpnI, 940<br />
HindIII, 1016<br />
6000 YCR010c<br />
1000<br />
EcoRI, 1287<br />
ClaI, 1348<br />
HincII, 1354<br />
SalI, 1354<br />
XhoI, 1360<br />
PstI, 3230<br />
3000<br />
URA3<br />
CYC1ter<br />
2000<br />
EcoRV, 3022<br />
KpnI, 1621<br />
Abb. 57: Das Plasmid p416YCR enthält<br />
das YCR010c-Allel unter Kontrolle des<br />
Originalpromotors (pYCR010c).<br />
150
Change language