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Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...

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Amp r<br />

Amp r<br />

Amp r<br />

SacII, 3404<br />

4000<br />

Abb. 58: Mit Hilfe des pUG30-Plasmids als<br />

Template wurden <strong>der</strong> ORF des GFP- und<br />

Kanamycingens amplifiziert.<br />

EcoRI, 7024<br />

SpeI, 6945<br />

BglII, 6882<br />

EcoRV, 6716<br />

SacI, 6608<br />

Amp r<br />

Amp r<br />

Amp r<br />

6000<br />

5000<br />

5000<br />

pUG30<br />

5785 bps<br />

pYDR384c<br />

p416YDR<br />

7116 bps<br />

4000<br />

3000<br />

pMET25<br />

7000<br />

YDR384c<br />

3000<br />

1000<br />

2000<br />

TEFter kanMX<br />

1000<br />

URA3<br />

CEN6/ARSH4<br />

EGFP3<br />

CYC1ter<br />

pTEF<br />

2000<br />

BamHI, 633<br />

SmaI, 639<br />

XmaI, 639<br />

EcoRI, 651<br />

ClaI, 2376<br />

EcoRV, 3210<br />

PstI, 3418<br />

ClaI, 576<br />

XbaI, 749<br />

BamHI, 855<br />

CYC1ter<br />

KpnI, 1663<br />

BglII, 1872<br />

BglI, 1491<br />

HindIII, 1527<br />

ClaI, 1536<br />

HincII, 1542<br />

SalI, 1542<br />

XhoI, 1548<br />

KpnI, 1809<br />

Abb. 60: Das Plasmid p416YDR enthält<br />

das YDR384c-Allel unter Kontrolle des<br />

Originalpromotors (pYDR284c).<br />

Amp r<br />

Amp r<br />

Amp r<br />

Anlagen<br />

Abb. 59: Das Plasmid YEp351-3HA diente<br />

bei <strong>der</strong> Amplifizierung <strong>von</strong> 3 x HA als<br />

Template.<br />

Amp<br />

4000<br />

5000<br />

5000<br />

YEp351-3HA<br />

SpeI, 27<br />

SacI, 6411<br />

BglI, 208<br />

4000<br />

5764 bps<br />

3000<br />

pYNR002c<br />

6000<br />

p416YNR<br />

CEN6/ARSH4<br />

6415 bps<br />

3000<br />

PstI, 3221<br />

BamHI, 131<br />

NdeI, 141<br />

HindIII, 186<br />

HA lacZ<br />

2µ<br />

1000<br />

2000<br />

YNR002c<br />

URA3<br />

1000<br />

LEU2<br />

2000<br />

EcoRV, 3013<br />

NdeI, 609<br />

Eco52I, 657<br />

CYC1ter<br />

HindIII, 966<br />

EcoRI, 998<br />

XbaI, 1002<br />

15<br />

EcoRI<br />

SacI<br />

KpnI<br />

SmaI<br />

XmaI<br />

BamHI<br />

XbaI<br />

SalI<br />

PstI<br />

54<br />

EcoRV, 1221<br />

EcoRI, 1332<br />

KpnI, 1722<br />

ClaI, 1818<br />

ClaI, 1339<br />

SalI, 1345<br />

XhoI, 1351<br />

KpnI, 1612<br />

Abb. 61: Das Plasmid p416YNR enthält<br />

das YNR002c-Allel unter Kontrolle des<br />

Originalpromotors (pYNR002c).<br />

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