Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...

Einleitung
Lactat und Glycerol. Mit Hilfe von DNA-Microarrays wurden von Haurie et al. (2001) die Expression
Cat8p-abhängiger Gene während des zweiphasigen Wachstums (Diauxie) auf Glu-
cose untersucht. In einem Δcat8-Stamm konnte kaum noch eine Expression von YCR010c
nachgewiesen werden. Dagegen war YNR002 das einzige Gen, das in dieser Mutante stärker
exprimiert wurde. Die Expression von YDR384c war dagegen durch die Deletion von
CAT8 nicht betroffen. Nur der Promotor von YCR010c enthält ein CSRE-Motiv. Somit könnte
YCR010c einer positiven Regulation durch Cat8p nach Glucosevebrauch unterliegen,
YNR002c dagegen negativ reguliert werden. Diese Befunde deuten darauf hin, dass die erhöhte
Expression von YNR002c in Abwesenheit von Cat8p den Expressionsausfall von
YCR010c ausgleichen könnte.
In ρ 0 -Zellen ist die Expression von YDR384c dramatisch erhöht (Guaragnella and Butow,
2003). Weiterhin konnten Guaragnella and Butow (2003) feststellen, dass der Transkriptionsaktivator
Gcn4p eine Rolle bei der Expression von YDR384c spielt.
In Candida albicans und S. cervisiae werden nach der Phagocytose der Zellen durch Macrophagen
spezifische Gene des Glyoxylatzyklus induziert. In S. cerevisiae wird YDR384c unter
diesen Bedingungen ebenfalls exprimiert (Lorenz and Fink, 2001).
Das YNR002c-Gen wird durch War1p positiv reguliert (Schüller et al., 2004). Dieser
Transkriptionsfaktor bindet an die Konsensussequenz 5´-CGGc/tTg/ct/gTAa/t-3´ und wird zur
Adaptation der Zellen an schwache organische Säuren, wie z. B. Sorbin-, Benzoe- und Propionsäure,
jedoch nicht Essigsäure, benötigt (Schüller et al., 2004; Kren et al., 2003).
Alle drei Homologen unterliegen der Regulation durch Sok2p. Die Deletion von SOK2 hat
eine niedrigere Expression von YCR010c, YDR384c und YNR002c zur Folge (Vachova et
al., 2004). Weiterhin produziert der Δsok2-Stamm weniger Ammonium in der alkalischen
Phase des Wachstums (Vachova et al., 2004) (vgl. Kapitel 1.3.3). Der Transkriptionsfaktor
Sok2p ist in verschiedenste zelluläre Prozesse involviert. Dies betrifft u. a. das Wachstum,
die Entwicklung und die Anpassung an Veränderungen der Umwelt (insbesondere Verfügbarkeit
von Nährstoffen) (Vachova et al., 2004).
Diese unterschiedlichen Regulationsmechanismen der GPR1-orthologen Gene in S. cerevisiae
deuten darauf hin, dass sie verschiedene Funktionen besitzen könnten.
1.3.3 Ammoniumsekretion der Hefe Saccharomyces cerevisiae
Palková et al. (2002) stellten fest, dass auf festem Nährmedium wachsende Kolonien der
Hefe S. cerevisiae den pH-Wert des sie umgebenden Mediums von sauer nach alkalisch und
umgekehrt ändern. Mittels cytogenetischer und genetischer Untersuchungen sowie Microarrays
wurde dieser Übergang von sauer nach alkalisch in sechs Phasen unterteilt. Der Übergang
ist mit der Produktion von flüchtigem nicht-protonierten Ammoniak verbunden, der als
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