Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...

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SL Stammlösung Tab. Tabelle TCA Trichloressigsäure TEMED N,N,N´,N´-Tetramethylethylendiamin U units (enzymatische Einheit) üN über Nacht v/v Volumenanteil/Volumenanteil v/w Masseanteil/Volumenanteil YPD yeast/pepton/dextrose (Hefeextrakt/Pepton/Glucose) Abkürzungsverzeichnis VI
1 Einleitung 1.1 Stressantwort von Mikroorganismen Einleitung Zellen haben die Fähigkeit auf Veränderungen von Umweltbedingungen, die physikalischen oder chemischen Ursprungs sein können, zu reagieren. Es handelt sich hierbei um Faktoren wie Temperatur, Druck, Strahlung, Salzkonzentration, Wassergehalt, Ionen, toxische chemische Wirkstoffe, pH-Wert und Verfügbarkeit von Nährstoffen. Die spezifischen Reaktionen erfordern ein komplexes Netzwerk an Signaltransduktionen. Die Adaptation an diese Bedingungen durch Anpassung der Genexpression und des Zellmetabolismus gewährleistet Wachstum und Vermehrung der Zellen. 1.1.1 Nährstoffmangel Nährstoffmangel führt in Hefezellen, in Abhängigkeit von der jeweils fehlenden Nährstoffkomponente, zur Veränderung und Anpassung des zellulären Metabolismus an die neuen Bedingungen. Saccharomyces cerevisiae gehört zu den fakultativ anaeroben Hefen. Eine Besonderheit von S. cerevisiae ist, dass sie unter aeroben und anaeroben Bedingungen Hexose-Zucker (z. B. Glucose, Fructose) vergären kann. Nicht vergärbare Substrate, wie z. B. Ethanol, Lactat oder Acetat, werden im oxidativen Metabolismus verwertet. Wächst S. cerevisiae als Batchkultur in Medium mit Glucose als C-Quelle, so kann das Wachstum in verschiedene Phasen unterteilt werden. Die erste Phase ist durch schnelles Wachstum charakterisiert, Glucose wird vergärt und gleichzeitig werden die für oxidativen Metabolismus notwendigen Gene reprimiert. Nach dem Glucoseverbrauch kommt es zum diauxischen Shift, d. h. die Hefezelle stellt ihren Stoffwechsel auf die aerobe Verwertung von Ethanol um. Dieser Prozess hat eine kurze lag-Phase zur Folge. Während des diauxischen Shifts werden die durch Glucose reprimierten Gene dereprimiert und die Kultur adaptiert ihren Metabolismus an die Verwertung von Ethanol und anderen Nebenprodukten der Gärung (z. B. Glycerin, Acetat) (Francois et al., 1987; Blanco et al., 2004). Die Derepression von Genen, die für die Verwertung von Ethanol benötigt werden, beginnt bereits bevor die Glucose vollständig verbraucht ist (Moehle and Jones, 1990). Das Wachstum in der dritten, der post-diauxischen Phase, ist wesentlich langsamer und endet mit dem Verbrauch des zur Verfügung stehenden Ethanols, Glycerins und Acetats. Danach geht die Kultur in die stationäre Phase über. S. cerevisiae bevorzugt die Verwertung vergärbarer Zucker, insbesondere Glucose. Auch bei einem Wachstum auf Mischmedien mit Glucose und Fructose oder Mannose als C-Quellen wird 1
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Material und Methoden 1 x Readersal
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3.2.3 Wachstum verschiedener Yarrow
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Ergebnisse Deshalb sollte das Wachs
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Ergebnisse werden. Lag der pH-Wert
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Ergebnisse Zellen, deren enthaltene
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Ergebnisse In den meisten eukaryoti
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Ergebnisse Abb. 24: Expression der
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Ergebnisse detektierten Banden um d
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Ergebnisse Die Ergebnisse des North
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Ergebnisse nur eine sehr schwache E
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A B OD600 8 7 6 5 4 3 2 1 0 0 10 20
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Ycr010cp-HA Ydr384cp-HA Ynr002cp-HA
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Ergebnisse 3.3.13.4 Expression in M
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Ergebnisse für die Zellen toxisch.
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W303 W303Δmsn2Δmsn4 W303Δgis1 18
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A B K1 K2 K3 K1 K2 K3 Ergebnisse a
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4.9 Mögliche Funktionen der Gpr1p-
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Amp r Amp r Amp r SacII, 3404 4000
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Lebenslauf Name: Margret Kuschel Ge
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