Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...

Material und Methoden
YNR-Cla-rev ATATCGATTTAGAAGAACACCTTATC ClaI
YNR-dA257-rev ATATCGATTTATGCGTAAGCGTTGTACC ClaI
YNR-dY266-rev ATATCGATTTAGTACGAGTTTTGTCT ClaI
YNR-dYNAYA-uni GCCTTCATTGCCTGGGGTATTGCCACAAG
YNR-GFP-uni CCATCCATTCGCATTACCTAGCAATGA-
TAAGGTGTTCTTCTCTAAAGGTGAAGAATTATT-
CACTG
YNR-HA-uni CAATGATAAGGTGTTCTTCTACCCATAC-
GATGTTCC
YNR(Hind)-473-uni GGTTAAGCTTCGGTGC HindIII
YNR-kan-rev GAAATGCATGAGAACAGTGTTGTTTTATAAAG-
GATTCTATGGCATAGGCCACTAGTGGATCTG
YNRPr-Sac-uni AGAGCTCAAGTTCTTGACTACCCCT SacI
YNR-Spe-uni ATACTAGTATGTCTGACAGAGAACAA SpeI
2.7 Mikroorganismen
2.7.1 Escherichia coli
Tab. 6: Verwendeter E. coli-Stamm.
Stamm Genotyp Referenz
DH5αC Δlac, endA1, gyrA96, hsdR17, recA1, relA1, supE44, thi-1,
U169 (φ80, lacZΔM15)
2.7.2 Saccharomyces cerevisiae
Strauss, MDC-
Berlin-Buch
Tab. 7: Verwendete und konstruierte S. cerevisiae-Stämme.
Stamm Genotyp Referenz
BY4741 MATa, his3Δ1, leu2Δ0, met15Δ0, ura3Δ0 EUROSCARF
DBY747 MATa, his3-1, leu2-3, leu2-112, trp1-289, ura3-52 ATCC 44774
W303 MATa, ade21, his311-15, leu23-112, trp11, ura31,
can1100, GAL, SUC2
W303Δmsn2Δmsn4 MATa, ade21, his311-15, leu23-112, trp11, ura31,
can1100, GAL, SUC2, msn2Δ3::HIS3,
msn4Δ::TRP1
W303Δgis1 MATa, ade21, his311-15, leu23-112, trp11, ura31,
can1100, GAL, SUC2, gis1Δ::LEU2
YN99-50 MATa, leu2Δ1, trp1Δ63, ura3-52,
ΔYDR384c::KanMX4, ΔYNR002c::KanMX4
YN99-67 MATa, his3Δ200, trp1Δ63, ura3-52,
ΔYCR010c::KanMX4loxP, ΔYNR002c::KanMX4
ATCC 200060
P. Estruch
H. Ronne
EUROFAN II
EUROFAN II
YN99-7 MATα, trp1Δ63, ura3-52, ΔYDR384c::KanMX4 EUROFAN II
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