Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...

3.3.1 Wachstum verschiedener Saccharomyces cerevisiae-Stämme
Ergebnisse
Der Test des Wachstums verschiedener Y. lipolytica-Stämme auf Minimalmedium mit unterschiedlichen
C-Quellen ergab, dass einige von den untersuchten Stämmen nicht auf Minimalmedium
mit Acetat/Glycerin als C-Quellen wachsen konnten (vgl. Kapitel 3.2.3).
Es sollte getestet werden, ob dieser stammspezifische Wachstumseffekt auch in der Hefe
S. cerevisiae auftritt (Abb. 15).
DL1
DBY747
W303
H30
Glucose Acetat/Glucose Acetat/Glucose Glycerin Acetat/Glycerin Acetat/Glycerin
pH4
pH6,5
pH4,0 pH6,5
Abb. 15: Vergleich des Wachstums verschiedener S. cerevisiae-Stämme auf Minimalmedium
mit unterschiedlichen C-Quellen. Die Stämme wurden üN in YPD-Flüssigmedium
kultiviert und einmal mit 1 x Readersalzen gewaschen. Es wurden 1 x 10 5
Zellen aufgetropft und die Platten 2 bis 4 d bei 28 °C inkubiert.
In Abb. 15 ist das Wachstum verschiedener S. cerevisiae-Stämme auf Minimalmediumplatten
mit unterschiedlichen C-Quellen dargestellt. Auf Minimalmedium mit Glucose, Acetat/Glucose
(pH4 bzw. pH6,5) wuchsen alle Stämme. Der Stamm W303 war nicht in der Lage
in Anwesenheit von Glycerin und Acetat/Glycerin (pH4 bzw. pH6,5) als C-Quellen zu
wachsen. Allerdings besitzt dieser Stamm keinen atmungsdefizienten Phänotyp. Möglicherweise
akkumumulierte eine erhaltene Mutation, die zum Verlust der Atmungsaktivität führte,
während der Kultivierung auf fermentierbaren C-Quellen. Die Stämme DBY747 und
YNΔycrΔydrΔynr konnten nicht auf Minimalmedium bei einem pH-Wert 4 mit Acetat/Glycerin
als C-Quellen wachsen. Betrug der pH-Wert des Mediums jedoch 6,5, so war ein Wachstum
dieser beiden Stämme nachweisbar.
Auch im Fall der Hefe S. cerevisiae gab es wie bei Y. lipolytica stammspezifische Unterschiede
im Wachstum auf Minimalmediumplatten mit Acetat/Glycerin als C-Quellen.
3.3.2 Wachstum der YN-Stämme auf verschiedenen C-Quellen
Zu Beginn der Arbeiten waren keine Unterschiede zwischen Stämmen mit Einzeldeletionen
der GPR1-Orthologen und dem Wildtyp im Wachstum auf verschiedenen C-Quellen bekannt.
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