Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...
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Ergebnisse<br />
<strong>der</strong> Mutantenphänotyp durch eine Mutation in einem an<strong>der</strong>en Gen als GPR1-2 aufgehoben<br />
worden, so hätten die Transformanden auf Minimalmedium mit Acetat wachsen müssen.<br />
Dies war nicht <strong>der</strong> Fall, möglicherweise wurde <strong>der</strong> Mutantenphänotyp durch eine Verän<strong>der</strong>ung<br />
im GPR1-2-Gen selbst hervorgerufen.<br />
Es konnten keine Supressormutationen in an<strong>der</strong>en Genen nachgewiesen werden, somit war<br />
es nicht möglich potentielle Interaktionspartner <strong>von</strong> <strong>Gpr1</strong>p zu identifizieren.<br />
3.2.2 Unterschiede im Wachstum zwischen PO1d und PO1dΔgpr1 auf verschiedenen<br />
C-Quellen<br />
Augstein (2001) stellte fest, dass die Deletion <strong>von</strong> GPR1 zu keiner erhöhten Essigsäuresensitivität<br />
führt. In <strong>der</strong> Arbeit <strong>von</strong> Gentsch (2003) wurde untersucht, ob es nicht doch leichte<br />
Wachstumsunterschiede zwischen den Stämmen PO1d und PO1dΔgpr1 gibt. Das Wachs-<br />
tum <strong>der</strong> beiden Stämme wurde im Plattentest und Submerskultur in Minimalmedium mit Glucose,<br />
Acetat bzw. Ethanol als C-Quelle getestet. Es konnte festgestellt werden, dass<br />
PO1dΔgpr1 nach dem Umsetzen <strong>der</strong> Zellen in Minimalmedium mit Acetat als C-Quelle eine<br />
längere lag-Phase zeigte als <strong>der</strong> Wildtypstamm PO1d.<br />
In dieser Arbeit sollte untersucht werden, inwieweit die beiden Y. lipolytica-Stämme PO1d<br />
und PO1dΔgpr1 sich im Wachstum auf Minimalmedium mit Acetat, Glycerin und Acetat/ Glycerin<br />
als C-Quellen unterscheiden. Die Ergebnisse des Wachstumstests sind in Abb. 12 dargestellt.<br />
PO1d<br />
PO1dΔgpr1<br />
Glucose Acetat Glycerin Acetat/Glycerin<br />
Abb. 12: Vergleich des Wachstums <strong>der</strong> Y. lipolytica-Stämme PO1d und PO1dΔgpr1 auf Minimalmedium<br />
mit verschiedenen C-Quellen. Die Kulturen wurden üN in YPD-<br />
Flüssigmedium kultiviert, einmal mit 1 x MMT gewaschen und 1 x 10 5 Zellen auf die<br />
Platten getropft.<br />
Der Wildtypstamm PO1d und <strong>der</strong> Deletionsstamm PO1dΔgpr1 zeigten auf Minimalmediumplatten<br />
mit Glucose, Acetat o<strong>der</strong> Glycerin als C-Quelle keinen Unterschied im Wachstum. Auf<br />
Minimalmedium mit Acetat/Glycerin als C-Quellen wuchs PO1d nicht, im Gegensatz dazu<br />
konnte <strong>der</strong> Stamm PO1dΔgpr1 auf diesem Medium wachsen.<br />
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