Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...
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3.2.3 Wachstum verschiedener Yarrowia lipolytica-Stämme<br />
Ergebnisse<br />
Es konnte ein Unterschied im Wachstum <strong>von</strong> PO1d und PO1dΔgpr1 auf Minimalmedium mit<br />
Acetat/Glycerin als C-Quelle festgestellt werden. Daraufhin sollte untersucht werden, ob dieser<br />
Phänotyp im Wachstum stammspezifisch o<strong>der</strong> ein allgemeiner Effekt ist (Abb. 14).<br />
B204-12C<br />
CXAU1<br />
E129<br />
H222<br />
W29<br />
MMG, 3d MMGly, 3d MMA, 6d MMAGly, 6d<br />
Abb. 14: Vergleich des Wachstums verschiedener Y. lipolytica-Stämme auf Minimalmedium<br />
mit unterschiedlichen C-Quellen. Die Stämme wurden üN in YPD-Flüssigmedium<br />
kultiviert und einmal mit 1 x MMT gewaschen. Es wurden 1 x 10 5 Zellen auf die<br />
Platten getropft.<br />
Abb. 14 zeigt das Wachstum unterschiedlicher Y. lipolytica-Stämme auf Minimalmediumplatten<br />
mit verschiedenen C-Quellen. Auf Minimalmedium mit Glucose, Glycerin o<strong>der</strong> Acetat<br />
konnten alle Stämme wachsen. Das Wachstum <strong>der</strong> Wildtypstämme H222 und W29 war auf<br />
Glucose und Glycerin besser als das <strong>der</strong> an<strong>der</strong>en Stämme. Auf Medium mit Acetat/Glycerin<br />
ist <strong>der</strong> Stamm B204-12C wie PO1d nicht mehr in <strong>der</strong> Lage zu wachsen, ebenso ist das<br />
Wachstum <strong>von</strong> E129 stark eingeschränkt. Es kann daher da<strong>von</strong> ausgegangen werden, dass<br />
<strong>der</strong> Unterschied im Wachstum <strong>von</strong> Y. lipolytica-Stämmen auf Minimalmediumplatten mit Acetat/Glycerin<br />
als C-Quellen stammspezifisch ist.<br />
3.3 Die <strong>Gpr1</strong>p-Orthologen in Saccharomyces cerevisiae<br />
In die Untersuchungen dieser Arbeit wurde S. cerevisiae einbezogen, da diese Hefe im Gegensatz<br />
zu Y. lipolytica nur drei <strong>Gpr1</strong>p-Orthologe enthält. Weiterhin standen Mutantenstämme<br />
mit Deletionen <strong>von</strong> einem, zwei o<strong>der</strong> allen dieser drei Gene zur Verfügung.<br />
Zunächst standen in S. cerevisiae grundlegende Untersuchungen des Wachstums <strong>der</strong><br />
Stämme mit Deletionen <strong>der</strong> GPR1-Orthologen im Vor<strong>der</strong>grund (vgl. Kapitel 3.3.2).<br />
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