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Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...

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3.2.3 Wachstum verschiedener Yarrowia lipolytica-Stämme<br />

Ergebnisse<br />

Es konnte ein Unterschied im Wachstum <strong>von</strong> PO1d und PO1dΔgpr1 auf Minimalmedium mit<br />

Acetat/Glycerin als C-Quelle festgestellt werden. Daraufhin sollte untersucht werden, ob dieser<br />

Phänotyp im Wachstum stammspezifisch o<strong>der</strong> ein allgemeiner Effekt ist (Abb. 14).<br />

B204-12C<br />

CXAU1<br />

E129<br />

H222<br />

W29<br />

MMG, 3d MMGly, 3d MMA, 6d MMAGly, 6d<br />

Abb. 14: Vergleich des Wachstums verschiedener Y. lipolytica-Stämme auf Minimalmedium<br />

mit unterschiedlichen C-Quellen. Die Stämme wurden üN in YPD-Flüssigmedium<br />

kultiviert und einmal mit 1 x MMT gewaschen. Es wurden 1 x 10 5 Zellen auf die<br />

Platten getropft.<br />

Abb. 14 zeigt das Wachstum unterschiedlicher Y. lipolytica-Stämme auf Minimalmediumplatten<br />

mit verschiedenen C-Quellen. Auf Minimalmedium mit Glucose, Glycerin o<strong>der</strong> Acetat<br />

konnten alle Stämme wachsen. Das Wachstum <strong>der</strong> Wildtypstämme H222 und W29 war auf<br />

Glucose und Glycerin besser als das <strong>der</strong> an<strong>der</strong>en Stämme. Auf Medium mit Acetat/Glycerin<br />

ist <strong>der</strong> Stamm B204-12C wie PO1d nicht mehr in <strong>der</strong> Lage zu wachsen, ebenso ist das<br />

Wachstum <strong>von</strong> E129 stark eingeschränkt. Es kann daher da<strong>von</strong> ausgegangen werden, dass<br />

<strong>der</strong> Unterschied im Wachstum <strong>von</strong> Y. lipolytica-Stämmen auf Minimalmediumplatten mit Acetat/Glycerin<br />

als C-Quellen stammspezifisch ist.<br />

3.3 Die <strong>Gpr1</strong>p-Orthologen in Saccharomyces cerevisiae<br />

In die Untersuchungen dieser Arbeit wurde S. cerevisiae einbezogen, da diese Hefe im Gegensatz<br />

zu Y. lipolytica nur drei <strong>Gpr1</strong>p-Orthologe enthält. Weiterhin standen Mutantenstämme<br />

mit Deletionen <strong>von</strong> einem, zwei o<strong>der</strong> allen dieser drei Gene zur Verfügung.<br />

Zunächst standen in S. cerevisiae grundlegende Untersuchungen des Wachstums <strong>der</strong><br />

Stämme mit Deletionen <strong>der</strong> GPR1-Orthologen im Vor<strong>der</strong>grund (vgl. Kapitel 3.3.2).<br />

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