Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...
Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...
Funktionelle Analyse von Proteinen der Gpr1/Fun34/yaaH ...
Erfolgreiche ePaper selbst erstellen
Machen Sie aus Ihren PDF Publikationen ein blätterbares Flipbook mit unserer einzigartigen Google optimierten e-Paper Software.
Ergebnisse<br />
Die Transformanden des Stammes YNΔynr, sowie <strong>der</strong> Ausgangsstamm YNΔynr und <strong>der</strong><br />
Wildtypstamm YN wurden 12 Tage auf GM-Platten bei 28 °C inkubiert. Die Ammoniumsekretion<br />
dieser Stämme wurde über einen Zeitraum <strong>von</strong> 25 min in MES-Puffer gemessen. Die<br />
Ergebnisse sind in Abb. 49 dargestellt.<br />
Der Wildtypstamm YN produzierte gegenüber dem Stamm YNΔynr mehr Ammonium. Die<br />
Ammoniumproduktion <strong>der</strong> Transformanden des Stammes YNΔynr war vergleichbar <strong>der</strong> des<br />
untransformierten Stammes YNΔynr. Die integrative Transformation des Stammes YNΔynr<br />
mit dem YNR002c-Allel konnte nicht dessen geringere Ammoniumsekretion aufheben. Wur-<br />
de <strong>der</strong> Stamm YNΔynr integrativ mit den Mutantenallelen <strong>von</strong> YNR002c (YNR-Q74 bzw.<br />
YNR-D259) transformiert, so hatte dies keinen Einfluss auf die sekretierte Ammoniummenge<br />
<strong>der</strong> Transformanden.<br />
Ammoniumsekretion in mg*ml-1*min-1<br />
0,25<br />
0,2<br />
0,15<br />
0,1<br />
0,05<br />
0<br />
YN<br />
YNDynr<br />
YNDynr[YIp]<br />
YNDynr[YIpYNR]<br />
YNDynr[YIpYNR-Q74]<br />
YNDynr[YIpYNR-D259]<br />
Abb. 49: Ammoniumsekretion <strong>der</strong> Stämme YN und YNΔynr sowie <strong>der</strong> Transformanden des<br />
Stammes YNΔynr. Die Stämme wurden üN in MG-Flüssigmedium kultiviert, einmal<br />
mit 1 x Rea<strong>der</strong>salzen gewaschen und auf GM-Medium getropft. Nach 12 d<br />
Inkubation bei 28 °C wurden die Zellen mit MES-Puffer gewaschen und die Ammoniumsekretion<br />
über 25 min bestimmt.<br />
111