COLETÂNEA BITEC2008-2010 - CNI

8ª EDIÇÃO 53Em seguida, foram colocadas em bandejas plásticas, contendo areia lavada e vermiculita até atingiro estágio de plântulas jovens. As bandejas permaneceram em casa de vegetação, recebendo irrigaçãodiária de água destilada e aplicação quinzenal de solução de derosal (5 mL.L -1 ), com o intuito de minimizaras contaminações fúngicas dos explantes na fase de descontaminação superficial deles.3.2.4.2 Descontaminação superficial e inoculação dos explantesApós três meses, foram coletados brotações apicais e seguimentos nodais para realização dos primeirostratamentos de desinfestação dos explantes.Primeiramente, os explantes foram lavados em água corrente e imersos em água destilada comdetergente neutro durante 30 minutos. Em seguida, lavados com água autoclavada e imersos por 24horas em solução de derosal (5 mL.L -1 ) (figura 1).A B CFigura 1: Descontaminação superficial de explantes de B. excelsa. A. Lavagem dos explantes;B. Imersão em detergente neutro; C. Imersão em fungicida derosal por 24 horas.Na câmara de fluxo laminar, os explantes receberam nova lavagem com água autoclavada e foramimersos em hipoclorito de sódio (água sanitária comercial com 2,0 a 2,5% p/p do principio ativo) emtempo de exposição e concentrações diferentes, sendo o último tratamento adicionado imersão emálcool (70%) como mostra a tabela 1.Após a assepsia, os explantes foram lavados em água autoclavada, podados e inoculados em tubosde ensaio (20x150 mm) contendo 10 mL de meio de cultura (figura 2), sendo algumas repetições como meio MS acrescidos ou não com PVP, e outras com o meio WPM (tabela 1), ambos contendo sacarose(30 g e 20 g, respectivamente), 4 g de ágar e diferentes dosagens do antibiótico clorafenicol (tabela 1). OpH dos meios foram ajustados para 5,8, antes da autoclavagem.