Faglig rapport 2005 - Helse Vest

Forskerutdanning - dr.grad 911019:Hvordan forbedre blodplatekonsentrater for transfusjon?Prosjektansvarlig: Esben Seljeskog (sees@ext.sir.no), Helse Stavanger HFAntioksidantstatus og holdbarhet av blodplaterBlodplater kan i dag oppbevares i inntil 7 dager i blodbanken før de må kasseres. Er detnoen sammenheng mellom antioksidantstatus hos blodgiveren og holdbarheten tilblodplatene? Esben Seljeskog ved SUS har utviklet en ny metodikk for å måleantioksidantstatus i plasma for å sammenlikne blodplateholdbarhet og blodgiversantioksidantstatus.Sentralt i prosjektet står kvantifisering av stoffet malondialdehyd (MDA):Frie radikaler, svært reaktive molekyler, som kan reagere med bl.a. flerumettede fettsyrer i plasmaeller i cellemembraner, starter en prosess som kalles lipid peroksidasjon. I denne prosessen dannesforskjellige reaksjonsprodukter – blant annet malondialdehyd. Hvis en person har lite MDA i plasmaindikerer det at vedkommendes antioksidantforsvar klarer å ta hånd om alle de frie radikalenekroppen blir utsatt for. Om man derimot finner mye MDA i plasma, kan det indikere at personen får iseg flere frie radikaler enn det kroppens forsvar klarer å uskadeliggjøre. I denne sammenheng brukerman gjerne begrepet oksidativt stress, og man sier at MDA er en biomarkør for oksidativt stress.Økte konsentrasjoner av MDA i plasma finner en gjerne ved forhold som de fleste av oss har hørt omfør i forbindelse med helse og kosthold; lite inntak av fisk, frukt og grønnsaker, redusert fysiskaktivitet eller røyking.Hvordan er så forholdet mellom lipid peroksidasjon og blodplatekonsentrater? Har noen blodgivere,f.eks. røykere, et svekket antioksidantforsvar, og vil dette gi en kortere levetid for denne gruppensblodplater? Finnes det genetiske faktorer eller miljøfaktorer som spiller inn?Metodeutvikling for kvantifisering av MDA har stått i fokus for forskningsarbeidet i 2005. HPLC (HighPerformance Liquid Chromatography) – metodikken er utarbeidet ved systematisk å prøve utforskjellige forhold ved prøveopparbeiding; syretype, konsentrasjoner og volumer, pH, inkubasjonstid,kolonnetype, mobilfasesammensetning, antikoagulant ved blodinnsamling og lignende. Metoden ervalidert ved stabilitet, linearitet, følsomhet, gjenfinning og kalibrering og gir fine kromatogrammer.Fra en nordisk biobank (NOBIDA) er serumprøver fra 250 personer analysert, både med vår nyemålemetode og med et kommersielt kit fra Chromsystems GmbH. Serum referanseintervaller for MDAer etablert; satt opp i en tabell etter kjønn og alder (tre aldersgrupper fra 18 til 84 år) vedretningslinjer gitt av IFCC (International Federation of Clinical Chemistry)Neste steg i prosjektet er å samle inn blodplatekonsentrater. Plasmaprøver fra giveren tas for målingav MDA, samtidig som blodplatekonsentratene skal undersøkes mht holdbarhet. Dette gjøres bl.a.med pH-målinger og koaguleringsmålinger i en thrombelastograf. Resultatene fra disse analysene vilkunne si noe om sammenhengen mellom holdbarheten til blodplatene og antioksidantstatus hosblodgiveren.326