THESE Maryse Bonnin Jusserand - Université de Bourgogne

4) Rôle de hisRS dans la voie de biosynthèse de l’histamine
Résultats
Une dernière hypothèse a donc été soulevée : celle du rôle du gène hisRS, le quatrième
gène de l’opéron impliqué dans la synthèse d’histamine. En effet, trois gènes sur quatre ont
été clonés dans le pGID052. Et si le rôle de hisRS était essentiel dans la voie de biosynthèse ?
Ce gène code une histidyl t-RNA synthétase. Sa fonction est imprécise, certains auteurs
suggèrent cependant son implication dans le mécanisme de régulation de l’expression du
cluster hdc (Martin et al, 2005).
Afin de déterminer si hisRS joue un rôle sur l’expression de hdcP, ce gène a été cloné
dans le vecteur intégratif pXT sous le contrôle d’un promoteur inductible par le xylose (Pxyl)
(Figure 28). Les souches de B. subtilis contenant le pDL seul (contrôle) ou le pDL-hdcP ont
été transformées avec le vecteur pXT-hisRS. Seules ont été sélectionnées les bactéries qui ont
intégrés au site chromosomique thrC le pXT-hisRS. Son expression est induite par ajout de 20
mM de xylose. L’activité β-galactosidase a été mesurée chez B. subtilis contenant les vecteurs
pDL-hdcP et pXT-hisRS intégrés (Figure 29). Aucune différence d’activité n’est observée
avec ou sans xylose. Ainsi hisRS ne semble pas avoir d’effet sur l’expression de hdcP.
Néanmoins, le rôle de hisRS sur l’expression de hdcA n’a pas été testé, car les expériences
avaient pour but principal de définir la région promotrice de hdcP. Il n’est donc pas exclu que
hisRS puisse réguler l’expression du gène de l’histidine décarboxylase.
Figure 28. Carte du vecteur pXT-hisRS
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