THESE Maryse Bonnin Jusserand - Université de Bourgogne
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Résultats<br />
Figure 29. Mesure <strong>de</strong> l’activité spécifique <strong>de</strong> la β-galactosidase (Umiller.mg -1 ) chez B.<br />
subtilis contenant les vecteurs pDL et pXT-hisRS, ou les vecteurs pDL-hdcP et pXThisRS,<br />
en fonction <strong>de</strong> la croissance bactérienne. A DO600nm = 0,7 ; 20 mM <strong>de</strong> xylose sont<br />
ajoutés pour induire l’expression <strong>de</strong> hisRS, cloné sous le contrôle du promoteur pxyl (t1 :<br />
DO600nm = 1,0 ; t2 : DO600nm = 1,1 ; t3 : DO600nm = 1,2 ; t4 : DO600nm = 1,5)<br />
Chez les bactéries à Gram positif, le gène hisRS n’est pas systématique présent au sein<br />
du locus hdc. C’est le cas par exemple <strong>de</strong> Clostridium perfringens, chez qui il n’existe pas <strong>de</strong><br />
gène similaire à hdcB et à hisRS. De plus les gènes hdcA et hdcP sont arrangés en divergon,<br />
comparé à l’organisation génétique <strong>de</strong> la voie HDC <strong>de</strong>s bactéries lactiques. Lan<strong>de</strong>te et al<br />
(2008) proposent que l’absence <strong>de</strong> ces <strong>de</strong>ux gènes indique qu’ils ne sont pas essentiels à la<br />
formation d’histamine et qu’ils co<strong>de</strong>nt <strong>de</strong>s fonctions accessoires. Cependant, Trip et al (2011)<br />
ont récemment montré le rôle crucial <strong>de</strong> la protéine HdcB dans la maturation <strong>de</strong> la forme<br />
active <strong>de</strong> l’histidine décarboxylase. Connaître le rôle <strong>de</strong> hisRS peut donc apporter <strong>de</strong>s<br />
informations importantes sur le métabolisme <strong>de</strong> l’histamine.<br />
Cette partie du projet européen <strong>de</strong>vait compléter l’étu<strong>de</strong> entreprise par l’<strong>Université</strong> <strong>de</strong><br />
Bor<strong>de</strong>aux 2, visant à comparer les phénotypes d’une souche <strong>de</strong> L. hilgardii porteuse du<br />
plasmi<strong>de</strong> pHDC, avec une souche curée du plasmi<strong>de</strong>. Devant l’échec à éluci<strong>de</strong>r le rôle <strong>de</strong><br />
l’histidine décarboxylase, nous avons focalisé nos recherches sur le rôle <strong>de</strong> l’ornithine<br />
décarboxylase <strong>de</strong> O. oeni. Le cluster odc présente une organisation génétique moins complexe<br />
que le cluster hdc, en effet, le cluster odc chromosomique contient <strong>de</strong>ux gènes, au lieu <strong>de</strong><br />
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