Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
CZE˛ŚĆ I<br />
Kra˛żek<br />
z antybiotykiem<br />
▲<br />
▲<br />
▲<br />
Strefa wewnętrzna:<br />
szczep op<strong>or</strong>ny<br />
Strefa czarna:<br />
średnia wrażliwość<br />
Ryc. 14. Szablon do określania wrażliwości.<br />
▼<br />
Strefa zewnętrzna:<br />
szczep wrażliwy<br />
WHO 91127<br />
Granicę strefy zahamowania ustala się gołym okiem w miejscu, gdzie rozpoczyna<br />
się widoczny wzrost; istnieją jednak trzy wyjątki:<br />
• W przypadku sulfonamidów i kotrimoksazolu w strefie zahamowania pojawia<br />
się słaby wzrost; nie należy go brać pod uwagę.<br />
• W przypadku określania wrażliwości β-laktamazododatnich gronkowców na<br />
benzylopenicyliny brzegi strefy zahamowania są wyraźnie widoczne i uniesione;<br />
łatwo uznać je za dodatni wynik testu, podczas gdy niezależnie od<br />
rozmiaru strefy zahamowania szczep należy opisać jako op<strong>or</strong>ny.<br />
• Pewne gatunki Proteus mogą wokół niektórych krążków z antybiotykami<br />
wytwarzać, w wyraźnie ograniczonej strefie zahamowania, cienką warstwę<br />
wzrostu mgławicowego, którego nie należy brać pod uwagę.<br />
Interpretacja wielkości stref zahamowania<br />
Stosowanie wz<strong>or</strong>nika. Dla każdego antybiotyku należy przygotować oddzielny<br />
wz<strong>or</strong>nik (patrz ryc. 14). Wynik można odczytać z jednoczesną interpretacją<br />
— wrażliwy, op<strong>or</strong>ny lub średnio wrażliwy: ,,wrażliwy’’, jeśli granica strefy<br />
wykracza poza czarny pierścień; ,,op<strong>or</strong>ny’’, jeśli nie obserwuje się strefy lub gdy<br />
jej granica mieści się w polu białego pierścienia; ,,średnio wrażliwy’’, jeśli granica<br />
strefy zahamowania leży w obrębie czarnego pierścienia.<br />
Stosowanie linijki. Wyniki pomiarów stref zahamowania w mm należy interpretować<br />
zgodnie z granicznymi średnicami przedstawionymi w tabeli 25.<br />
Bezpośrednie a pośrednie oznaczanie<br />
lekowrażliwości<br />
W opisanej powyżej metodzie inoculum przygotowywane jest z pierwotnej płytki<br />
hodowlanej lub z czystych hodowli. Jest to tak zwany pośredni test lekowrażliwości.<br />
W przypadkach, gdy niezbędny jest szybki wynik, zamiast standardowego<br />
inoculum można wyk<strong>or</strong>zystać badany materiał, np. mocz, dodatnie posiewy z krwi<br />
lub wymazy ropy. W przypadku moczu należy najpierw zbadać pod mikroskopem<br />
osad, oceniając obecność dowodów infekcji, np. obecność granulocytów i/lub<br />
drobnoustrojów. Następnie można wyk<strong>or</strong>zystać mocz jako inoculum w metodzie<br />
standardowej. Jeśli barwienie Grama inkubowanych hodowli z krwi, wykazujących<br />
wzrost bakterii, lub wymazów z ropy potwierdzi obecność dużej liczby<br />
mikro<strong>or</strong>ganizmów jednego typu, materiały te mogą zostać użyte jako bezpośrednie<br />
inoculum.Jesttotzw.bezpośredni test lekowrażliwości; zaletą testu bezpośredniego<br />
jest szybsze o 24 godziny uzyskanie wyniku. Główną wadę stanowi brak<br />
właściwego przygotowania inoculum. Jeśli na płytkach pojawi się zbyt słaby lub<br />
zbyt intensywny wzrost lub gdy obecne są mieszane hodowle, należy bardzo<br />
uważnie interpretować wyniki i powtórzyć test używając czystych hodowli.<br />
133