24.10.2014 Views

Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..

Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..

Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..

SHOW MORE
SHOW LESS

You also want an ePaper? Increase the reach of your titles

YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.

CZE˛ŚĆ I<br />

Kra˛żek<br />

z antybiotykiem<br />

▲<br />

▲<br />

▲<br />

Strefa wewnętrzna:<br />

szczep op<strong>or</strong>ny<br />

Strefa czarna:<br />

średnia wrażliwość<br />

Ryc. 14. Szablon do określania wrażliwości.<br />

▼<br />

Strefa zewnętrzna:<br />

szczep wrażliwy<br />

WHO 91127<br />

Granicę strefy zahamowania ustala się gołym okiem w miejscu, gdzie rozpoczyna<br />

się widoczny wzrost; istnieją jednak trzy wyjątki:<br />

• W przypadku sulfonamidów i kotrimoksazolu w strefie zahamowania pojawia<br />

się słaby wzrost; nie należy go brać pod uwagę.<br />

• W przypadku określania wrażliwości β-laktamazododatnich gronkowców na<br />

benzylopenicyliny brzegi strefy zahamowania są wyraźnie widoczne i uniesione;<br />

łatwo uznać je za dodatni wynik testu, podczas gdy niezależnie od<br />

rozmiaru strefy zahamowania szczep należy opisać jako op<strong>or</strong>ny.<br />

• Pewne gatunki Proteus mogą wokół niektórych krążków z antybiotykami<br />

wytwarzać, w wyraźnie ograniczonej strefie zahamowania, cienką warstwę<br />

wzrostu mgławicowego, którego nie należy brać pod uwagę.<br />

Interpretacja wielkości stref zahamowania<br />

Stosowanie wz<strong>or</strong>nika. Dla każdego antybiotyku należy przygotować oddzielny<br />

wz<strong>or</strong>nik (patrz ryc. 14). Wynik można odczytać z jednoczesną interpretacją<br />

— wrażliwy, op<strong>or</strong>ny lub średnio wrażliwy: ,,wrażliwy’’, jeśli granica strefy<br />

wykracza poza czarny pierścień; ,,op<strong>or</strong>ny’’, jeśli nie obserwuje się strefy lub gdy<br />

jej granica mieści się w polu białego pierścienia; ,,średnio wrażliwy’’, jeśli granica<br />

strefy zahamowania leży w obrębie czarnego pierścienia.<br />

Stosowanie linijki. Wyniki pomiarów stref zahamowania w mm należy interpretować<br />

zgodnie z granicznymi średnicami przedstawionymi w tabeli 25.<br />

Bezpośrednie a pośrednie oznaczanie<br />

lekowrażliwości<br />

W opisanej powyżej metodzie inoculum przygotowywane jest z pierwotnej płytki<br />

hodowlanej lub z czystych hodowli. Jest to tak zwany pośredni test lekowrażliwości.<br />

W przypadkach, gdy niezbędny jest szybki wynik, zamiast standardowego<br />

inoculum można wyk<strong>or</strong>zystać badany materiał, np. mocz, dodatnie posiewy z krwi<br />

lub wymazy ropy. W przypadku moczu należy najpierw zbadać pod mikroskopem<br />

osad, oceniając obecność dowodów infekcji, np. obecność granulocytów i/lub<br />

drobnoustrojów. Następnie można wyk<strong>or</strong>zystać mocz jako inoculum w metodzie<br />

standardowej. Jeśli barwienie Grama inkubowanych hodowli z krwi, wykazujących<br />

wzrost bakterii, lub wymazów z ropy potwierdzi obecność dużej liczby<br />

mikro<strong>or</strong>ganizmów jednego typu, materiały te mogą zostać użyte jako bezpośrednie<br />

inoculum.Jesttotzw.bezpośredni test lekowrażliwości; zaletą testu bezpośredniego<br />

jest szybsze o 24 godziny uzyskanie wyniku. Główną wadę stanowi brak<br />

właściwego przygotowania inoculum. Jeśli na płytkach pojawi się zbyt słaby lub<br />

zbyt intensywny wzrost lub gdy obecne są mieszane hodowle, należy bardzo<br />

uważnie interpretować wyniki i powtórzyć test używając czystych hodowli.<br />

133

Hooray! Your file is uploaded and ready to be published.

Saved successfully!

Ooh no, something went wrong!