Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..

CZE˛ŚĆ I
Ocena makroskopowa
Wygląd płynu mózgowo-rdzeniowego powinien być oceniony i opisany jako:
klarowny, mglisty, mętny, ropny, żółty (związany z hemolizą lub żółtaczką jąder
podkorowych), z domieszką krwi, z włóknami lub warstwą fibryny.
Badanie mikroskopowe
Przygotowanie próbki
Jeśli w ocenie makroskopowej stwierdza się ropny płyn mózgowo-rdzeniowy
(bardzo mętny), to badanie można przeprowadzić bez odwirowania. W pozostałych
przypadkach płyn mózgowo-rdzeniowy powinien zostać odwirowany
w sterylnej probówce (najlepiej o objętości 15 ml) w 10 000 g przez 5 – 10 minut.
Usunąć supernatant, używając sterylnej pipety Pasteura z dopasowanym gumowym
kapturkiem, i przenieść do innej probówki do testów biochemicznych i/lub
serologicznych. Osad użyć do wykonania dalszych testów mikrobiologicznych.
Mikroskopia bezpośrednia
Do badania mikroskopowego użyć kropli osadu umieszczonej między szkiełkiem
podstawowym i nakrywkowym, oceniając obecność:
– leukocytów (wielojądrzaste neutrofile lub limfocyty),
– erytrocytów,
– bakterii,
– grzybów.
Przy podejrzeniu obecności drożdżaków Cryptococcus neoformans na szkiełku
podstawowym należy zmieszać pobrany ezą osad z tuszem chińskim, nakryć
szkiełkiem nakrywkowym i oglądać preparat, poszukując typowych, otoczkowych,
sferycznych form grzybów.
W regionach, w których występuje śpiączka afrykańska, konieczne jest uważne
poszukiwanie aktywnego ruchu wyposażonych w witkę świdrowców z rodzaju
Trypanosoma.
Wolno żyjące w wodzie ameby (Naegleria fowleri), które dostają się do
ośrodkowego układu nerwowego przez nos, wywołują rzadkie i zazwyczaj
śmiertelne zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych. Mogą być widoczne w preparacie
bezpośrednim w postaci aktywnie poruszających się ogranizmów, wielkością
zbliżonych do neutrofilów.
Barwienie preparatów metoda˛ Grama
Czynniki wywołujące zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych są często widoczne
w preparatach barwionych metodą Grama, stąd badanie to jest bardzo istotne.
Preparaty należy wysuszyć na powietrzu, utrwalić łagodnie podgrzewając
i wybarwić metodą Grama. Oglądać pod powiększeniem ×1000 (w immersji)
przez co najmniej 10 minut lub do chwili stwierdzenia obecności bakterii.
W tabeli 7 przedstawiono ważne obserwacje diagnostyczne związane z różnymi
formami zapalenia opon mózgowo-rdzeniowych.
37