Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
BADANIA SEROLOGICZNE<br />
Powszechnie stosowany test aglutynacji wyk<strong>or</strong>zystuje Staphylococcus aureus,<br />
zawierający na swojej powierzchni białko A. Jest to białko wiążące fragment Fc<br />
przeciwciał IgG. Gronkowce opłaszczone przeciwciałami IgG w obecności<br />
swoistego antygenu dają wyraźnie widoczną aglutynację. Odczyn stosowany jest<br />
głównie do identyfikacji drobnoustrojów hodowanych z próbek klinicznych lub<br />
do wykrywania antygenów bakteryjnych w płynach ustrojowych zakażonych<br />
pacjentów (płyn mózgowo-rdzeniowy w przypadku zapalenia opon mózgowo-<br />
-rdzeniowych).<br />
Odczyny aglutynacji wyk<strong>or</strong>zystywane są do wykrywania wirusa Epsteina-Barr<br />
(mononukleoza zakaźna), rotawirusów, różyczki <strong>or</strong>az antygenów bakteryjnych<br />
(m.in. Haemophilus i Streptococcus A i B).<br />
Odczyn immunoflu<strong>or</strong>escencji<br />
W odczynach immunoflu<strong>or</strong>escencji immun<strong>or</strong>eagent (antygen lub przeciwciało)<br />
znakowany jest barwnikiem flu<strong>or</strong>escencyjnym, na przykład flu<strong>or</strong>esceiną lub<br />
rodaminą, a reakcja antygenu z przeciwciałem wykrywana jest w mikroskopie<br />
flu<strong>or</strong>escencyjnym. W odczynie immunoflu<strong>or</strong>escencji bezpośredniej do wykrycia<br />
obecności specyficznego antygenu wyk<strong>or</strong>zystuje się znaczone flu<strong>or</strong>esceiną<br />
przeciwciała. Odczyny są przydatne w szybkiej identyfikacji Chlamydia trachomatis,<br />
C. psittaci, Rickettsia spp., Streptococcus pyogenes, B<strong>or</strong>detella pertussis,<br />
C<strong>or</strong>ynebacterium diphtheriae, Legionella pneumophila i innych drobnoustrojów<br />
izolowanych z próbek klinicznych.<br />
W odczynie immunoflu<strong>or</strong>escencji pośredniej (indirect flu<strong>or</strong>escent antibody<br />
— IFA) wykonuje się badania seryjnych rozcieńczeń surowicy pacjenta ze<br />
specyficznym antygenem, a dla uwidocznienia reakcji dodaje się znakowane<br />
flu<strong>or</strong>esceiną przeciwciała przeciw ludzkim immunoglobulinom IgG lub IgM. Na<br />
przykład, w serodiagnostyce kiły, szkiełko z ads<strong>or</strong>bowanym antygenem Treponema<br />
pallidum zanurza się w surowicy pacjenta i spłukuje. Następnie na szkiełku<br />
umieszcza się znakowane flu<strong>or</strong>esceiną przeciwciała przeciw ludzkim immunoglobulinom,<br />
spłukuje i preparat ogląda się w mikroskopie flu<strong>or</strong>escencyjnym. Jeśli<br />
surowica pacjenta zawiera specyficzne przeciwciała przeciw Treponema pallidum,<br />
widoczne są jasno flu<strong>or</strong>yzujące krętki. Przy braku specyficznych przeciwciał<br />
przeciwkrętkowych w surowicy pacjenta krętki nie świecą. Test IFA może<br />
być również wyk<strong>or</strong>zystywany do identyfikacji innych bakterii, na przykład<br />
prątków gruźlicy, a z powodu większej liczby znakowanych flu<strong>or</strong>esceiną<br />
przeciwciał łączących się z antygenem stanowi często czulszą metodę niż test<br />
immunoflu<strong>or</strong>escencji bezpośredniej.<br />
Odczyny serologiczne w diagnostyce kiły<br />
Odczyny serologiczne wykonywane w diagnostyce kiły to testy krętkowe<br />
i niekrętkowe. Do odczynów niekrętkowych należą: VDRL i RPR. Użyty w nich<br />
antygen przygotowywany jest z antygenów niekrętkowych, takich jak kardiolipina-lecytyna<br />
i wykrywa podobne do przeciwciał reaginy, które są obecne<br />
w surowicy wielu pacjentów zkiłą, ale mogą także występować w surowicy<br />
pacjentów z innymi ostrymi i przewlekłymi sch<strong>or</strong>zeniami. Testy są praktyczne,<br />
niedrogie i powtarzalne, mimo że nie całkiem swoiste. Mogą potwierdzać<br />
rozpoznanie wczesno- lub późnoobjawowej kiły lub być podstawą rozpoznania<br />
142
Change language