Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
You also want an ePaper? Increase the reach of your titles
YUMPU automatically turns print PDFs into web optimized ePapers that Google loves.
CZE˛ŚĆ I<br />
Szybki test szkiełkowy jest testem przesiewowym, przeznaczonym do wykrywania<br />
aglutynin, podczas gdy test probówkowy jest testem potwierdzającym,<br />
który służy do ilościowej oceny aglutynin. Każdy dodatni wynik otrzymany<br />
w teście szkiełkowym należy potwierdzić w teście probówkowym.<br />
Materiały i odczynniki zawarte w zestawie<br />
do wykrywania aglutynin w brucelozie<br />
Zawiesina antygenu (B. ab<strong>or</strong>tus, B. melitensis) w butelce z zakraplaczem<br />
Ujemna surowica kontrolna<br />
Dodatnia surowica kontrolna<br />
Dodatkowe materiały i odczynniki potrzebne do wykrywania<br />
aglutynin w brucelozie<br />
Aplikat<strong>or</strong> patyczków<br />
Szklana płytka<br />
Dermatograf<br />
Pipety, 50 – 1000 µl<br />
Linijka<br />
Sterylny roztwór NaCl (0,85%)<br />
Probówki i stojak na probówki<br />
Stoper<br />
Łaźnia wodna z kontrolowaną temperaturą<br />
Test szkiełkowy do wykrywania aglutynin w brucelozie<br />
Preferowany w p<strong>or</strong>ównaniu z testem probówkowym jako mniej skomplikowany.<br />
1. Próbka surowicy musi być czysta, bez widocznych resztek tłuszczowych. Nie<br />
powinna wykazywać hemolizy ani być zanieczyszczona przez bakterie. Nie<br />
może być inaktywowana przez podgrzewanie, ponieważ w ten sposób<br />
zniszczone zostałyby niektóre termolabilne aglutyniny.<br />
2. Przygotować szklaną płytkę, rysując za pomocą dermatografu i linijki dwa<br />
rzędy 2,5-centymetrowych kratek. Każdy rząd zawierający 5 kratek wystarcza<br />
na przeprowadzenie badania antygenu z rozcieńczeniami surowicy do 1:320.<br />
3. Za pomocą 0,2-mililitrowej pipety nanieść 0,08, 0,04, 0,02, 0,01 i 0,005 ml<br />
surowicy w rzędzie kratek.<br />
4. Do każdej surowicy dodać 1 kroplę właściwej dla testu szkiełkowego<br />
zawiesiny dobrze wymieszanego antygenu.<br />
5. Zaczynając od najwyższego rozcieńczenia wymieszać patyczkiem mieszaninę<br />
surowica-antygen. Końcowe rozcieńczenia są zależne od rozcieńczeń w makroskopowym<br />
odczynie probówkowym i wynoszą odpowiednio 1:20, 1:40,<br />
1:80, 1:160 i 1:320.<br />
6. Trzymającpłytkęw obu dłoniach delikatnie wymieszać, wykonując15–20kolistych<br />
ruchów. Oglądać mieszaninę w dobrym świetle przez 1 minutę,<br />
poszukując śladów aglutynacji. Reakcje pojawiające się później mogą być<br />
związane z wysychaniem reagentów na szkiełku i powinny być potwierdzone<br />
wteście probówkowym.<br />
151
Change language