Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Podstawowe procedury laboratoryjne w ... - digicollection.or..
Create successful ePaper yourself
Turn your PDF publications into a flip-book with our unique Google optimized e-Paper software.
CZE˛ŚĆ I<br />
Sugerowany zestaw podłoży obejmuje:<br />
• agar z krwią z rozmazem S. aureus, ułatwiającym satelitarny wzrost H. influenzae<br />
i z krążkiem zawierającym optochinę, umieszczonym w centrum<br />
rozsiewu,<br />
• agar czekoladowy,<br />
• agar MacConkeya.<br />
Płytki z agarem z krwią i z agarem czekoladowym należy inkubować w35– 36°C<br />
w atmosferze wzbogaconej dwutlenkiem węgla (np. eksykat<strong>or</strong>), a płytkę<br />
MacConkeya w powietrzu atmosferycznym.<br />
Jeśli w barwionym preparacie obecne są skupiska Gram-dodatnich ziarenkowców,<br />
przypominające kształtem winogrona, zaleca się wyk<strong>or</strong>zystanie dodatkowo<br />
płytki agarowej z mannitolem (MSA). Obecność Gram-dodatnich drożdżopodobnych<br />
struktur może być wskazaniem do posiewu na podłoże Sabouraud (dla<br />
którego konieczna jest inkubacja przez co najmniej 3 dni w 35 – 37°C). Posiew na<br />
podłoża MSA i Sabouraud nie musi być wykonywany rutynowo dla wszystkich<br />
próbek plwociny.<br />
Posiewy powinny być odczytywane po całonocnej inkubacji (18 godzin),<br />
a reinkubacja przez dodatkowe 24 godziny jest wskazana, jeśli wzrost jest słabszy<br />
niż oczekiwany na podstawie obserwacji mikroskopowych lub gdy obecne są<br />
bardzo drobne kolonie.<br />
Typowe wyniki obserwacji przedstawiono poniżej:<br />
• Płaskie, jasne kolonie z wgłębionymi środkami i strefą zielonej (α-) hemolizy<br />
<strong>or</strong>az strefą zahamowania wzrostu wokół krążka z optochiną mogą wskazywać<br />
na S. pneumoniae. Jeśli odczyt testu z krążkiem z optochiną w pierwszym<br />
posiewie nie jest rozstrzygający, należy powtórzyć test na przesiewie. Nie<br />
można zapominać, że w fizjologicznej fl<strong>or</strong>ze jamy ustnej i gardła występują<br />
inne α-hemolizujące szczepy (wspólnie nazywane paci<strong>or</strong>kowcami zieleniejącymi).<br />
• Drobne, kropelkowe kolonie rosnące na płytce agarowej z krwią w postaci<br />
niehemolizujących kolonii satelitarnych i znacznie większe kolonie na płytce<br />
agaru czekoladowego lub agaru z krwią sugerują obecność H. influenzae.<br />
Kolonie te najczęściej są liczne, zwykle ponad 20 na płytce. Niektóre<br />
lab<strong>or</strong>at<strong>or</strong>ia dla potwierdzenia identyfikacji wykonują testy z czynnikami<br />
wzrostu X i V, które jednak wymagają uważnej kontroli. Serologiczne<br />
typowanie szczepów izolowanych z układu oddechowego najczęściej nie jest<br />
przydatne, ponieważ większość z nich jest ,,sz<strong>or</strong>stka’’ i nie podlega typowaniu.<br />
• Kruche, suche, szarobiałe kolonie na płytkach agaru z krwią lub agaru<br />
czekoladowego, które można przesuwać wcałości za pomocą ezy, mogą<br />
wskazywać na M. catarrhalis. Jeśli istnieje potrzeba, można przeprowadzić<br />
testy rozkładu cukrów (wszystkie wyniki testów ujemne), ale większość<br />
lab<strong>or</strong>at<strong>or</strong>iów ich nie wykonuje. Drobnoustroje M<strong>or</strong>axella są silnie oksydazododatnie,<br />
a wygląd ich kolonii i obraz mikroskopowy są bardzo charakterystyczne.<br />
Jakkolwiek m<strong>or</strong>fologicznie M<strong>or</strong>axella przypomina Neisseria spp., do różnicowania<br />
można użyć testu z trójmaślanem glicerolu, który jest hydrolizowany<br />
przez M<strong>or</strong>axella.<br />
• Średniej wielkości, złotoszare kolonie tw<strong>or</strong>zone są przez S. aureus. Testy<br />
koagulazowy i test fermentacji mannitolu są dodatnie, choć szkiełkowy odczyn<br />
koagulacji (odczyn ,,związanej’’ koagulazy) jest czasami ujemny. Jeśli istnieje<br />
sprzeczność między wyglądem kolonii i testem szkiełkowym, należy przeprowadzić<br />
probówkowy test koagulazy (,,wolna’’ koagulaza).<br />
83
Change language